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牙周病和尖周病是常见的口腔疾病,是病理性失牙的最主要原因,牙周健康被世界卫生组织(WHO)列为衡量人类健康的十大标准之一。牙周膜成纤维细胞是牙周和根尖周组织中最重要的细胞成分,是牙周和根尖周组织修复和再生的基础。牙周膜成纤维细胞在牙根表面的再附着是牙周治疗成功的关键。牙龈成纤维细胞是邻近的牙龈组织中的主要细胞成分,与牙周膜成纤维细胞在很多方面非常相似,但细胞的功能不同。并且该细胞容易向根面移行,与根面接触后引起牙周袋的纵向深入和牙根吸收,成为牙周治疗最大的障碍。 本研究采用改良的基于PCR和消减杂交技术而建立起来的克隆差异表达基因技术,研究体外培养的人牙周膜成纤维细胞相对于人牙龈成纤维细胞差异表达的基因,尤其是新基因,以期从分子水平认识牙周膜成纤维细胞的基因表达特征,为深入了解牙周组织再生的分子机理奠定基础,同时新基因的克隆也为我国在该领域的研究提供更高的起点,跃居世界前沿水平。 利用该方法,我们构建了人牙周膜成纤维细胞与牙龈成纤维细胞差异表达基因的扣除cDNA文库。从扣除文库中随机挑选了103个含有插段的克隆,经酶切鉴定有大小在700bp以上插段的克隆45个,经反向Northern blot