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猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起猪的一种高度接触性的急性肠道传染病,主要以呕吐、水样腹泻和脱水为特征。2010年以来,我国多个地区突然爆发由PEDV变异株引起的初生仔猪腹泻,其临床症状、发病率和死亡率均较此前常见的PED严重,给养猪业造成了巨大的经济损失。目前对PEDV的致病性与免疫特征了解不够深入,缺乏标准防控程序,本研究旨在探索PEDV流行毒株与宿主间的感染免疫特性,为进一步阐明该病的发病机制奠定基础。用自河北省某猪场分离的PEDV HBMC/2012株分别感染3日龄和21日龄健康仔猪,评价该毒株的致病性。3日龄仔猪感染后2-3 d(dpi)出现严重的腹泻和呕吐等典型症状,持续3 d左右逐渐好转,感染后8 h即可在肛拭子中检测到病毒,并一直持续到实验结束(13 d)。剖检可见小肠壁变薄,肠绒毛脱落或增粗,内充满淡黄色内容物,部分小肠内充满气体,肠系膜淋巴结出血。21日龄仔猪的临床表现较3日龄仔猪轻,感染后2 d出现不同程度的腹泻,没有出现呕吐症状,病理变化也较轻。感染后3、7 d在血清和肠道内可检测到病毒核酸,感染后23 d在相应样品内未检测到。免疫组化检测发现PEDV主要分布在小肠的中后段,小肠绒毛上皮细胞内的病毒检出率最高。该结果表明PEDV HBMC/2012毒株具有明显的致病性,其所致疾病的严重程度与日龄密切相关。进而通过流式细胞术、ELISA和免疫组化等手段,评价PEDV感染21日龄仔猪的全身和局部免疫反应及相关免疫分子的变化。感染后19 d(dpi)仔猪体内的抗体水平达到高峰,感染早期(3 dpi),外周血淋巴细胞(PBMC)的特异增殖能力有所提高,CD3+CD4+CD8-Th、CD3+CD4-CD8+Tc、CD3+CD4-CD8-γδT和CD3-CD4-CD8+细胞亚群的含量显著增加;7 dpi,CD3-CD4-CD8+细胞显著低于对照组,CD3+CD4+CD8-Th、CD3+CD4-CD8+Tc细胞含量回落,与对照组无显著差异,而CD3+CD4-CD8-γδT的含量仍然极显著高于对照组。感染后3 d,感染组CD3+CD4+CD8+Tm细胞亚群含量显著低于空白对照组,而感染后7 d高于空白对照组,但两组差异不显著。该结果提示PEDV能够诱导机体特异性免疫应答,不同T细胞亚群参与了免疫应答。PEDV感染仔猪的十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠与肠系膜淋巴结等局部组织中的肥大细胞、单核-巨噬细胞以及SWC1a+或/和SWC8+的粒细胞增多,杯状细胞分泌MUC2的功能明显下降,但是肠系膜淋巴结细胞的增殖活性没有明显变化。此结果表明肥大细胞、单核-巨噬细胞以及粒细胞等均参与了局部免疫反应,肠道黏膜MUC2黏蛋白含量的降低可能是PEDV导致仔猪腹泻的关键因素。对PEDV HBMC/2012株致病性与感染免疫特性的初步探索,可以为进一步阐明该病毒的致病与免疫机制提供科学依据。