目的:近年来,包括美国和中国在内的许多国家不孕不育的发生率大大增加,其中约10%左右的不孕夫妇为自发性不孕,许多的研究报道显示这可能与接触化学物质有关。乙烯利（Ethephon,ETH）是一种应用非常广泛的植物生长调节剂。有报道显示ETH可造成多种组织器官受损,具有免疫毒性﹑肾毒性和肝毒性。然而,ETH对妊娠过程,特别是对母体子宫内膜蜕膜化的影响还未见有报道。在哺乳动物中,子宫内膜蜕膜化是妊娠过程中的一个关键环节,子宫内膜蜕膜化异常可导不孕、胎儿宫内发育迟缓、早产、流产、以及先兆子痫等异常妊娠的发生。因此,本研究旨在探究孕早期ETH暴露对小鼠子宫内膜蜕膜化的影响,为进一步研究ETH的生殖毒性提供实验依据。方法:1.建立染毒孕鼠模型:孕鼠从妊娠第1天（GD1）起,ETH暴露组每天给予71.25﹑142.5和285mg/kg的ETH灌胃,对照组给予等体积蒸馏水,分别于妊娠第6﹑7和8天上午收集小鼠血清和子宫组织。进行以下实验:（1）称量孕鼠体重及子宫重量;（2）计数胚胎着床数目;（3）Western blot、RT-PCR检测蜕膜化标志分子COX2、HOXA10、MMP9、BMP2和PR的表达;（4）Western blot检测GPR120的表达;（5）ELISA检测血清雌激素（estradiol,E2）和孕激素（progesterone,P4）水平;（6）甘油三酯检测试剂盒检测甘油三酯的变化;（7）Western blot、RT-PCR检测与脂肪酸合成﹑脂肪酸摄取和转运﹑脂肪酸β氧化相关因子的表达;2.构建假孕小鼠体内人工诱导蜕膜化模型:将雌性CD1小鼠与输精管结扎的雄性CD1小鼠进行交配,次日见阴栓视为假孕第一天,标记为PPD1,于假孕第四天一侧子宫角注射玉米油诱导蜕膜化。从PPD1天起,ETH暴露组每天给予285mg/kg ETH灌胃,对照组小鼠给予等体积蒸馏水,于PPD8天上午收集人工诱导蜕膜化小鼠诱导侧子宫内膜组织。进行以下实验:（1）称量对照组与ETH暴露组假孕小鼠蜕膜化诱导侧和非诱导侧的子宫重量;（2）Western blot、RT-PCR检测诱导侧蜕膜组织中蜕膜化标记分子COX2、HOXA10和BMP2的表达;（3）甘油三酯检测试剂盒检测对照组与ETH暴露组诱导侧蜕膜组织中甘油三酯的变化;（4）Western blot、RT-PCR检测诱导侧蜕膜组织中与脂肪酸合成﹑脂肪酸摄取和转运﹑脂肪酸β氧化相关因子的表达;3.构建体外基质细胞人工诱导蜕膜化模型:从小鼠子宫内膜组织中分离获得原代子宫内膜基质细胞,用雌﹑孕激素对正常组和ETH暴露组原代小鼠子宫内膜基质细胞进行体外诱导蜕膜化。进行以下实验:（1）RT-PCR检测蜕膜化标记分子dtprp﹑HOXA10的表达;（2）甘油三酯检测试剂盒检测ETH暴露后甘油三酯的变化;（3）BODIPY探针检测ETH暴露后脂滴沉积情况;（4）Western blot检测ETH暴露后GPR120的表达,过表达GPR120后检测ETH暴露组dtprp表达的变化。4.繁殖实验模型构建:孕鼠从妊娠第1天（GD1）起至妊娠第9天（GD9）,ETH暴露组每天给予285mg/kg ETH灌胃,对照组给予等体积蒸馏水。从GD10天起停止染毒正常饲养直至产仔,记录新生鼠的数量。结果:1.ETH暴露对小鼠子宫内膜蜕膜化的影响:与对照组相比,285mg/kg ETH暴露组孕GD6﹑GD7和GD8天小鼠子宫胚胎着床数量明显减少,子宫湿重比显著降低。RT-PCR结果显示孕GD7天285mg/kg ETH暴露组子宫内膜蜕膜组织中蜕膜化标记分子HOXA10和BMP2m RNA表达水平显著低于对照组,COX2 m RNA表达水平显著高于对照组。Western Blot结果显示孕GD6﹑GD7和GD8天285mg/kg ETH暴露组HOXA10蛋白表达水平显著降低,COX2﹑MMP9和PR蛋白表达水平显著上升。2.ETH暴露对体内体外人工诱导蜕膜化的影响:与对照组相比,285mg/kg ETH暴露组小鼠子宫人工诱导蜕膜化反应程度降低,诱导侧与非诱导侧子宫湿重之比显著降低。Real-time PCR结果显示285mg/kg ETH暴露组BMP2和HOXA10 m RNA表达水平显著降低。在体外小鼠子宫内膜基质细胞人工诱导蜕膜化模型中同样显示ETH暴露组dtprp和HOXA10 m RNA表达水平显著低于对照组。3.ETH暴露对小鼠体内雌孕激素水平的影响:ELISA结果显示285mg/kg ETH暴露组孕GD8天小鼠血清雌激素水平显著低于对照组,孕GD7和GD8天小鼠血清孕激素水平显著低于对照组。4.ETH暴露对小鼠子宫内膜脂肪酸代谢的影响:甘油三酯检测结果显示GD6和GD8天子宫内膜组织中285mg/kg ETH暴露组甘油三酯含量显著高于对照组。体内体外人工诱导蜕膜化结果同样显示285mg/kg ETH暴露组甘油三酯含量显著高于对照组。RT-PCR结果显示285mg/kg ETH暴露组GD7天子宫内膜组织和人工诱导蜕膜化诱导侧子宫内膜组织中与脂肪酸代谢相关基因表达显著改变。体外基质细胞人工诱导蜕膜化模型中bodipy结果显示与对照组相比,ETH暴露组细胞内脂滴聚集明显增多,甘油三酯含量显著增高。5.GPR120参与介导ETH暴露引起的蜕膜化受损过程:Western blot结果显示ETH暴露后体内体外GPR120表达显著降低。过表达GPR120后能够显著改善ETH暴露对小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化的影响。6.ETH暴露使小鼠产仔数减少:繁殖实验结果显示ETH暴露后怀孕小鼠产仔数明显减少。结论:孕早期ETH暴露抑制小鼠子宫内膜蜕膜化和脂肪酸代谢,GPR120参与介导ETH暴露引起的蜕膜化受损过程。