麻疹反向遗传及SARS冠状病毒样颗粒的研究

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麻疹病毒属于副粘病毒科麻疹病毒属.副粘病毒为一组有包膜病毒,属于单负链RNA病毒家族,基因组为单股、线性、不分节段的负链RNA,长度约为15.5kb.单股负链不分节段RNA家族除副粘病毒外,尚有其它三个成员:弹状病毒科、丝状病毒科及Borna病毒科.1994年这个家族中狂犬病毒首先成功建立反向遗传学方法.目前这个家族中已有多数病毒建立起了反向遗传学技术平台,并且在此基础上,通过基因点突变、基因插入或删除技术可以很方便的对相应病毒进行基因操作,从而极大地方便了对于病毒调节元件、病毒蛋白质功能以及构建病毒载体等方面的研究和理解.通过本部分工作,构建了麻疹病毒CC-47株N蛋白的原核表达质粒,在大肠杆菌中进行了表达和纯化,并将纯化的N蛋白标记辣根过氧化物酶(HRP)建立起检测麻疹病毒抗体的双抗原夹心法ELISA.以纯化N蛋白作为筛选抗原对本室人源噬菌体抗体库进行筛选,获得了抗麻疹病毒N蛋白的人源Fab.病毒样颗粒(VLPs)由于类似天然的病毒颗粒结构而代表一类特殊的亚单位疫苗.与普通的亚单位疫苗相比,它们由于类似真实病毒颗粒而更容易被机体免疫系统识别,并以一个接近真实构象的形式呈递病毒抗原、刺激机体免疫应答,因而是一个非常好的疫苗形式.
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