【摘 要】
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目的:检测高脂血症患者血清外泌体的浓度,研究在不同脂质水平下血清外泌体浓度的表达差异,检测高脂血症患者外泌体中miR-122的表达水平,研究不同脂质水平下血清外泌体miR-122的表达差异。研究外泌体miR-122在高脂血症发生发展中的作用,探究其在不同类型高脂血症发生发展中的作用。方法:1.采用沉淀法提取血清外泌体,用透射电镜和Western blot进行外泌体的鉴定;2.双抗体夹心酶联免疫吸附
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目的:检测高脂血症患者血清外泌体的浓度,研究在不同脂质水平下血清外泌体浓度的表达差异,检测高脂血症患者外泌体中miR-122的表达水平,研究不同脂质水平下血清外泌体miR-122的表达差异。研究外泌体miR-122在高脂血症发生发展中的作用,探究其在不同类型高脂血症发生发展中的作用。方法:1.采用沉淀法提取血清外泌体,用透射电镜和Western blot进行外泌体的鉴定;2.双抗体夹心酶联免疫吸附法检测血清外泌体浓度;3.荧光定量PCR法检测内参基因miR-16和标本中血清外泌体miR-122的相对荧光强度;4.比较高脂血症患者组和健康对照组血清外泌体浓度和血清外泌体miR-122的差异。结果:1.在透射电镜下观察到外泌体是具有清晰膜立体结构的囊泡小体,大小约为100-200nm;使用Western Blot通过外泌体表面标记物检测发现外泌体的特异性标记物CD9表达阳性,则可以说明使用沉淀法提取的物质是外泌体,可以用于后续的核酸提取和检测。2.高胆固醇血症外泌体浓度为9.18±1.64(×1010颗粒数/m L),高甘油三酯血症外泌体浓度为8.39±2.09(×1010颗粒数/m L),混合型高脂血症外泌体浓度8.75±2.01(×1010颗粒数/m L),而健康对照组外泌体浓度为8.63±2.50(×1010颗粒数/m L)。尽管血清外泌体的浓度在高脂血症患者组与健康对照组之间不存在差异（P＞0.05）,但是我们发现高胆固醇血症患者中,血清外泌体浓度和胆固醇含量存在线性关系（r=0.369,P=0.011）,而高甘油三酯血症患者血清中甘油三酯与外泌体之间没有明显的关系（r=0.023,P=0.879）。3.在我们的研究中发现高胆固醇血症血清外泌体miR-122的表达与对照组对比具有明显差异（P＜0.05）,即胆固醇会影响血清外泌体miR-122的表达。在高甘油三酯血症患者中,血清外泌体miR-122的表达与对照组相比存在明显差异（P＜0.05）。结论:1.高胆固醇血症、高甘油三酯血症和混合型高脂血症的患者中血清外泌体浓度和正常对照组比较没有显著差异,但在高胆固醇血症患者中,血清外泌体浓度与胆固醇有一定的正相关性,然而高甘油三酯血症的患者中没有发现血清外泌体浓度与甘油三酯的关系。2.高胆固醇血症、高甘油三酯血症和混合型高脂血症的患者中血清外泌体miR-122相对表达量和正常对照组比较没有显著差异,但是在高胆固醇血症中不同分组的血清外泌体miR-122的表达有差异,高甘油三酯血症中不同分组的血清外泌体miR-122的表达也有差异。
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