目的 本课题通过实验研究,对温下方药的抑瘤作用,诱导肠癌细胞凋亡作用及相关机理进行深入探讨,以期为临床治疗肠癌提供新思路及有效方药。 方法 体内实验研究,应用移植性肿瘤模型,进行抑瘤、增效、减毒、增强免疫功能及相关机制的研究;体外实验,运用血清药理学方法,及MTT、FCM、LSCM技术,检测含药血清对细胞生长的抑制作用,又从形态学观察、周期分析、凋亡率检测、凋亡调控蛋白表达、细胞内钙浓度及线粒体膜电位检测几方面进行温下方含药血清诱导肠癌细胞凋亡及其作用机制的研究。 结果 提出中医防治大肠癌的基本思路,重视温下法的合理运用;体内实验结果表明温下方有明显的抑瘤、减毒作用,抵抗化疗药物所致免疫器官萎缩,增加血清中免疫细胞因子IL-6及TNF-α含量;体外细胞培养实验结果表明,温下方含药血清作用24小时,明显抑制肠癌细胞生长,形态学观察可见明显的凋亡细胞,肠癌细胞凋亡率显著增高,肠癌细胞明显阻滞于S期,可上调抑癌基因p53表达,下调原癌基因Bcl-2表达,增加细胞内钙浓度,降低线粒体膜电位。 结论 温下法可用于肠癌的治疗,温下方具有明显的抑瘤作用,与化疗药配伍有减毒之功,并能增强机体免疫力;对肠癌细胞有明确的诱导凋亡作用,其作用机制可能与阻滞细胞周期,调节基因的表达,增加细胞内钙浓度,降低线粒体膜电位的表达有关。