【摘 要】
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目的探究年龄因素对人脂肪来源干细胞（ADSCs）生物学特性的影响,比较不同年龄组人ADSCs的形态学、衰老特征、分化潜能、表面标志物表达、增殖能力方面的差异;以及不同年龄组人ADSCs对成纤维细胞增殖、迁移的影响。方法收集2020年1月至2020年12月就诊于联勤保障部队第九四〇医院烧伤整形外科,27例健康患者的脂肪组织,年龄0-60岁。按供体年龄分为6组,A组:0-9岁（4例）、B组:10-19
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目的探究年龄因素对人脂肪来源干细胞（ADSCs）生物学特性的影响,比较不同年龄组人ADSCs的形态学、衰老特征、分化潜能、表面标志物表达、增殖能力方面的差异;以及不同年龄组人ADSCs对成纤维细胞增殖、迁移的影响。方法收集2020年1月至2020年12月就诊于联勤保障部队第九四〇医院烧伤整形外科,27例健康患者的脂肪组织,年龄0-60岁。按供体年龄分为6组,A组:0-9岁（4例）、B组:10-19岁（4例）、C组:20-29岁（5例）、D组:30-39岁（5例）、E组:40-49岁（5例）、F组:50-59岁（4例）。获取各组的ADSCs并培养,传代培养获得第3代ADSCs,应用相差显微镜检测其形态学特征,通过CCK-8法检测各组ADSCs的增殖能力,体外成脂、成骨诱导检测各组ADSCs的分化潜能,采用流式细胞仪检测各组ADSCs的表面标志物表达水平,通过qPCR检测各组HGF、PPAR-γ、typeⅢcollagen、DbX2的表达水平。收集2020年就诊于联勤保障部队第九四〇医院烧伤整形外科1例健康患者皮肤组织,获取成纤维细胞并培养,传代培养获得第2代成纤维细胞,制备不同年龄组ADSCs条件培养基（Adipose-derived stem cells-conditioned medium,ADSCs-CM）,通过CCK-8法检测各组ADSCs-CM培养的成纤维细胞的增殖能力,细胞划痕法检测各组ADSCs-CM培养的成纤维细胞的迁移能力。使用SPSS22.0软件进行数据分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果所有年龄组细胞均呈典型梭形,低龄组细胞可见细胞核小,细胞形态均匀相似;高龄组细胞的细胞核较大,形态不均匀。ADSCs细胞增殖能力随年龄增长,逐渐降低。体外成脂分化诱导结果:随年龄增大,ADSCs分化成脂能力逐渐下降;体外成骨分化诱导结果:随年龄增大,ADSCs分化成骨能力逐渐下降。各组ADSCs的间充质干细胞阳性表面标志物CD29、CD73、CD90、CD105表达率均在93%以上;阴性表面标志物CD34、CD45表达率均在2%以下。PPARγ、HGF、typeⅢcollagen的表达水平均随年龄的增长而下降;Db X2的表达水平随年龄的增长而呈上升趋势。β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数随年龄的增长而上升,而A与B、C组间的差异无统计学意义,A组与D、E、F间的差异有统计学意义（P<0.05）。各组ADSCs-CM均可促进成纤维细胞的增殖,但各组间的差异无统计学意义;随着年龄的增加,ADSCs-CM促进成纤维细胞迁移的能力逐渐下降。结论人的ADSCs的增殖能力、多向分化能力及分泌多种促进成纤维细胞增殖和迁移的细胞因子的能力随着年龄的增长出现下降趋势,但ADSCs成脂分化能力从40岁后才出现明显下降,各年龄组ADSCs都可以促进成纤维细胞增殖和迁移。
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