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益生菌是一类具有生物活性和对机体健康有益的微生物。乳酸菌是其中重要的一种。大量研究表明,乳酸菌等益生菌具有促进水产动物生长、降低饵料系数、提高宿主免疫力等作用,同时因其对环境无压力,遂逐渐成为抗生素的良好替代品之一。裂壶藻(Schizochytrium limacinum)因富含DHA等不饱和脂肪酸,能有效弥补水产动物因DHA的匮乏而导致的生长乏力,越来越受到人们的青睐。本文从野生驼背鲈(CromZleptes altivelis)肠道中分离得到一株乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)并命名为HNL12,探究其体外部分益生特性,并分别研究了饲料中添加不同浓度的HNL12以及不同浓度和比例的HNL12与裂壶藻联用对驼背鲈生长、非特异性免疫及抗病力的影响。主要研究内容及结果如下:(1)HNL12对模拟人工胃/肠液的耐受性及自凝集效果分析:研究了乳酸乳球菌HNL12对不同pH人工模拟胃/肠液处理4h后的耐受性,结果表明,pH2.0组HNL12的数量有微弱下降,但与对照组(0h)相比无显著性差异(p>0.05);pH4.0组HNL12的数量基本不变,pH6.8组HNL12的数量与对照组(Oh)相比有所上升但差异不显著(p>0.05);pH8.0组HNL12的数量有微弱下降,但与对照组(0h)相比也无显著性差异(P>0.05),说明HNL12对人工模拟胃/肠液有较好的耐受性。自凝集实验结果显示,HNL12自凝集率随着室温下孵育时间的延长而升高,室温孵育1h时HNL12自凝集率为35.57%,而室温孵育10h时自凝集率上升到79.2%,表明HNL12有较好的粘附特性。(2)在基础饲料中分别添加0(A组,对照)、1×106CFU/g(B组)、1×108CFU/g(C组)和1 ×1010CFU/g(D组)的HNL12并连续投喂4周后,检测各组驼背鲈的体重、体长。结果表明,C组的体重及体长均显著性高于其他三组(p<0.05),C组和D组的增重率(PWG)、特定生长率(SGR)显著高于B组及对照组(p<0.05);各组实验鱼类非特异性免疫指标检测结果表明:投喂1周后,C组和D组的超氧化物歧化酶(SOD)活力与对照组相比显著性增高(p<0.05);投喂2周后,3个实验组的头肾巨噬细胞呼吸爆发活力、血清酸性磷酸酶(ACP)活性、血清溶菌酶活性均显著高于对照组(p<0.05);投喂3周后,C组的呼吸爆发活力显著高于对照组(p<0.01),B组和C组的超氧化物歧化酶活性显著低于对照组(p<0.05),D组的酸性磷酸酶活性显著性低于对照组(p<0.05);投喂4周后,D组的超氧化物歧化酶活性显著低于对照组(p<0.05),C组的溶菌酶活性显著高于对照组(p<0.05)。投喂4周后,同时以哈维氏弧菌攻毒,结果显示:C组的相对保护率(RPS)最高,达到了 53.14%;其次是D组,相对保护率为50.20%;B组最低,相对保护率为30.98%。(3)以分别添加终浓度为1×108CFU/g HNL12(菌单用组)、1%裂壶藻粉(藻单用组)以及1×108CFU/g HNL12和1%裂壶藻粉(菌藻联用组)的饲料连续投喂驼背鲈4周后,裂壶藻或HNL12单用及联用的实验组的体重、体长、增重率和特定生长率均显著高于对照组(p<0.05),菌藻联用组的体长与菌或藻单用组没有显著性差异(p>0.05),但菌藻联用组的体重、增重率、特定生长率均显著高于菌或藻单用组(p<0.05)。非特异性免疫指标检测结果表明:菌藻联用组的头肾巨噬细胞呼吸爆发(RB)活性显著增加(p<0.05),在第三周时达到最大;投喂1周后,菌藻联用组的SOD活性显著高于对照组(p<0.05);投喂3周后,菌藻联用组的AKP活性均显著高于菌或藻单用组和对照组(p<0.05);投喂4周后,菌藻联用组的AKP活性显著高于对照组(p<0.05)。连续投喂4周后以哈氏弧菌攻毒检测的结果显示:菌藻联用组的相对保护率为68.63%,藻单用组的相对保护率为59.41%,菌单用组的相对保护率为56.08%。总之,乳酸乳球菌HNL12在体外对模拟人工胃肠液具有较好的耐受性和较高的自凝集率;将其拌料投喂驼背鲈,发现其对驼背鲈具有促进生长、提高非特异性免疫力以及提高抗哈维氏弧菌的作用。裂壶藻与HNL12联用对促进驼背鲈生长、提高其非特异性免疫及抗病力等方面均优于单独使用裂壶藻或HNL12。表明乳酸乳球菌HNL12和裂壶藻作为驼背鲈的免疫增强剂具有良好研究与应用前景。