肌肉生成抑制素基因的克隆、表达及免疫原性研究

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chanck5800
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该研究根据GenBank中注册的MSTN基因序列设计引物,采用RT-PCR方法成功地从鸡胚、鹅胚及乳猪肌肉中扩增到MSTN全基因的cDNA片段,将此3个不同来源的MSTN基因的cDNA片段分别克隆至pGEM-T-Easy载体中进行序列测定,得到3个不同来源的MSTN基因的cDNA序列.结果表明,此3个不同来源的MSTN基因cDNA长度均为1128bp,编码375个氨基酸和一个终止密码子.将该实验中获得的MSTN序列提交到GenBank中进行注册,获得了3个序列注册号,它们分别为AY448007(鸡源的)、AY448008(猪源的)、AY448009(鹅源的).它们之间的核苷酸序列的同源性在84.5%~94.6%之间,氨基酸序列的同源性在91%~100%之间.将它们与GenBank中10种不同动物的MSTN的DNA序列进行比较,MSTN基因核苷酸在不同物种之间的同源性在82.2%以上.相应的氨基酸的序列的同源性在86.7%以上,其中C-末端功能片段氨基酸序列的同源性几乎为100%,说明MSTN基因在进化过程中相对比较保守.应用大肠杆菌表达的融合蛋白MSTN-B、MSTN-Q及重组噬菌体φT-MSTN-B、φT-MSTN-Q主动免疫动物后能产生抗体,具有一定的提高肌肉生长的作用,为进一步开发基因工程MSTN疫苗的研究奠定基础.
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