中草药添加剂与抗生素相比具有几乎无毒、无残留的特点,通常被视为理想的添加剂。中草药提取物中的有效成分多为植物次生代谢物,具有提高动物生产性能、改善动物代谢、提高动物机体免疫功能的作用。虽然中草药在畜禽生产上的研究和应用较多,但是在奶牛上进行系统研究和应用较少,其作用机理在许多方面还不清楚。因此,本试验进行研究自配的复方中草药添加剂对奶牛生产性能、瘤胃代谢和免疫性能的影响以及机理,为在奶牛养殖上开发利用中草药提供科学依据。第1章、复方中草药添加剂对奶牛生产性能、体细胞数和血清免疫球蛋白含量的影响本试验为了研究复方中草药添加剂对泌乳期奶牛生产性能、体细胞数和血清免疫球蛋白含量的影响。选择泌乳后期（201±19 d）、牛群结构、产奶性能相似的荷斯坦奶牛80头,平均分为试验组和对照组。试验组在全混合日粮中添加复方中草药添加剂,添加量为每头牛每天30g（即1.4d/kg DM）。预试期5天,正试期共计30天。选用金银花（3%-8%）、益母草（4%～10%）、杜仲（5%～15%）、蒲公英（5%～15%）、黄芪（5%～15%）等中草药提取物,与有机载体（30%～60%）混合均匀配制而成。结果表明:1)通过检测得知,本试验用的复方中草药添加剂的主要活性成分主要为绿原酸（0.090%）、咖啡酸（0.012%）、黄芪甲苷（<0.01%）和盐酸益母草碱（<0.02%）。2)饲喂复方中草药添加剂不会影响奶牛的干物质采食量,但是可显著提高奶牛的产奶量和降低乳中的体细胞数（P<0.05）,降低隐性乳房炎的发病率。3)饲喂复方中草药添加剂可以显著提高奶牛血清中IgG和IgM的含量（P<0.05）,对IgA的含量没有显著的影响（P>0.05）。结果说明,复方中草药添加剂不会影响奶牛的干物质采食量,可增加奶牛的产奶量和降低体细胞数,可提高奶牛的体液免疫水平。第2章、复方中草药添加剂对奶牛血液生化、抗氧化和免疫指标的影响本试验研究复方中草药添加剂对泌乳期奶牛血液生化、抗氧化和免疫指标的影响,选择4头泌乳中期[泌乳天数（101±12）d]、体重相近[（603±48）kg]、体况良好并安装永久性瘤胃瘘管的经产（2胎）荷斯坦奶牛。试验采用4×4拉丁方设计,分4期进行,每期28 d（预试期7 d,正式期14 d,排空期7 d）。试验材料同试验一。结果表明:1)B、C、D三组白细胞数及中性粒细胞率显著高于A组（P<0.05）,且都处于正常范围之内。C组淋巴细胞率显著低于A组（P<0.05）,B和D组较A组有降低的趋势（P<0.10）。B组血小板数显著高于A和D组（P<0.05）。2)与A组相比,B组谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）活性有所降低,而C、D两组ALT和AST活性有所增加,但各组之间差异不显著（P>0.05）,其中C和D组的AST活性超出正常范围。各种其他生化指标均差异不显著（P>0.05）。3)B组生长激素（GH）浓度显著高于A组（P<0.05）,B组和D组催乳素（PRL）浓度显著高于A组（P<0.05）。4)B、C、D组丙二醛（MDA）含量显著低于A组（P<0.05）。B组超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）及过氧化氢酶（CAT）活力显著高于A组（P<0.05）,C、D两组较A组有增高的趋势（P<0.10）。5)B组的IgM含量显著高于A组（P<0.05）,C、D两组一氧化氮（NO）含量显著高于A组（P<0.05）。各组IgA、IgG含量差异不显著（P>0.05）。6)血清中IL-2和IL-4的含量随着中草药的添加量增加而呈线性显著增加（P<0.05）,而IL-6的含量则出现线性下降（P<0.05）。7)4个组的CD3+T淋巴细胞率未见显著差异（P>0.05）,B组CD4+T淋巴细胞率显著高于A组（P<0.05）,B组和C组的CD8+T淋巴细胞率也显著低于A组（P<0.05）,CD8+T淋巴细胞率随着中草药的添加量增加出现先降低而后升高的现象,而B组和C组的CD4+/CD8+比例显著高于A组（P<0.05）。结果表明,复方中草药添加剂能够通过调节血液免疫细胞数量和细胞因子的活性以及提高抗氧化能力来调节机体的免疫性能。第3章、复方中草药添加剂对奶牛瘤胃内环境参数的影响本试验研究复方中草药添加剂对泌乳期奶牛瘤胃内环境参数的影响,试验设计同试验二。结果表明:1)中草药添加剂对奶牛瘤胃液pH值有稳定作用（6.20-6.84）,B组（30 g/d）奶牛饲喂4h后瘤胃液pH值显著高于其它3个组（P<0.05）。2)氨氮浓度随着复方中草药添加量的增加而增加,但是差异均不显著（P>0.05）。3)日粮添加中草药添加剂有降低瘤胃液中总挥发性脂肪酸含量的趋势（P<0.10）,饲喂后4 h和6 h总挥发性脂肪酸含量随着中草药添加量的增加而呈显著线性下降（P<0.01）。中草药添加剂可以提高瘤胃液乙酸含量,B组（30 g/d）奶牛乙酸含量在饲喂2h后显著高于A组和D组（80g/d）（P<0.05）。它还可以提高丙酸、丁酸含量,增加乙酸/丙酸比值,且饲喂后6h有增加瘤胃液中乙酸/丙酸的趋势（P<0.10）,丁酸含量随着中草药添加量的增加而下降。4)随着中草药添加量的增加,瘤胃微生物蛋白含量有逐步升高,而乳酸菌含量有略微下降,但是这些差异均不显著（P>0.05）。结果说明,复方中草药添加剂可以改变瘤胃内环境参数,调控瘤胃发酵。第4章、复方中草药添加剂对奶牛瘤胃细菌菌群结构和组成的影响本试验通过高通量测序技术来研究中草药添加剂对泌乳期奶牛细菌菌群结构和组成的影响,揭示中草药对微生物的影响机制。结果表明:1)16个样品共得到1,120,712条序列,1,095,818条有效序列,大约有97.8%的原始序列通过了所有质量控制。序列长度为253 bp左右。2)中草药的添加没有明显影响瘤胃细菌的丰富度和多样性,但是C组（50 g/d）奶牛的细菌种数量显著低于其它3个组（P<0.05）。3)在门水平上,相对含量大于0.1%的菌门共10个,拟杆菌门、硬壁菌门、变形菌门是优势菌门。C组（50 g/d）奶牛的黏胶球形菌门的丰度显著低于其它3个组（P<0.05）,蓝细菌门的丰度随着中草药添加量的增加呈线性增加趋势（P=0.08）。4)在属水平上,相对含量大于0.1%的菌属共35个,普雷沃菌属、密螺旋体属、纤维杆菌属和RC9属是优势菌属。随着复方中草药添加量的增加,瘤胃球菌属的丰度显著上升（P<0.05）,丁酸弧菌属和多形拟杆菌属的丰度却显著下降（P<0.05）。5)通过聚类热图和主成分分析得知,A组和D组,B组和C组的遗传距离更接近,菌群组成和结构更相似。结果说明,复方中草药添加剂对瘤胃液细菌的丰富度和多样性没有显著影响,但是不同的添加量可以改变细菌的菌群结构和组成。第5章、复方中草药添加剂对奶牛肝脏和乳腺组织免疫性能的影响本试验研究复方中草药添加剂对泌乳期奶牛肝脏和乳腺组织免疫性能的影响,通过免疫组化检测肝脏和乳腺组织中的炎症通路,通过荧光定量PCR技术来检测肝脏和乳腺组织中细胞因子和蛋白质合成基因的mRNA的表达。结果表明:1)免疫组化检测表明,复方不草药添加剂对肝脏中的p38蛋白的阳性指数没有显著影响（P<0.05）,而B、C和D组的TLR4蛋白的阳性指数显著低于A组（P<0.05）。它可增加乳腺中的p38蛋白的阳性指数,但差异不显著,对TLR4没有显著影响（P>0.05）,可显著降低p53蛋白的阳性指数（P<0.05）,显著增加Bcl-2蛋白的阳性指数（P<0.05）。2)复方中草药添加剂可以极显著的抑制肝脏中的TNF-α、TGF-β1和IFN-γ的mRNA表达,B组（30 g/d）奶牛的AS1、AS2和β-casein的mRNA表达量极显著高于其它3个组（P<0.01）,而对各组奶牛的κ-casein、JaK2、STA T5和mTOR的mRNA表达没有显著影响（P>0.05）。它可显著提高乳腺组织中的细胞因子IL-2和IL-4的mRNA表达水平（P<0.05）,可以显著降低C组（50 g/d）奶牛IL-6的mRNA表达。结果说明,复方中草药添加剂能够调节肝脏和乳腺组织中的炎症信号通路蛋白和细胞因子的表达,因而影响机体的免疫功能。