草鱼鳞酶解物促嗜热链球菌增殖作用及其对胞外多糖影响的研究

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草鱼鳞是水产品加工过程中产生的副产物,含有丰富的蛋白质,且氨基酸种类较为齐全,常常被作为胶原蛋白、明胶等产品的来源。草鱼鳞的酶解物具有一定的生物活性。然而由于海洋资源的浪费,每年都有大量的水产品副产物被丢弃,其中包括鱼鳞,从而造成生物资源的浪费和环境污染。本课题着眼于此,回收草鱼鳞,利用其高蛋白的特性以及具有一定生物活性的酶解物,对草鱼鳞进行酶解工艺优化,旨在提高水产品副产物的综合利用率,为水产品源的功能性食品的研究提供理论支持。1正交试验法优化草鱼鳞酶解工艺利用单因素实验和正交试验,对比碱性酶Alcalase 2.4L FG和风味蛋白酶酶解草鱼鳞所得产物对嗜热链球菌增殖的影响,确定能够更好地促进嗜热链球菌增殖的酶,即风味蛋白酶。风味蛋白酶酶解草鱼鳞的最优条件为:加酶量6%、料液比1:5 g/m L、酶解时间3 h、酶解温度50℃。在风味蛋白酶酶解草鱼鳞的最优条件下,草鱼鳞酶解物在合成培养液中的最佳浓度为1.5 g/L时,促进嗜热链球菌增殖效果最好。2草鱼鳞酶解产物的分离与体外抗氧化活性的研究通过膜分离技术对草鱼鳞酶解物(Grass Fish Scales Hydrolysate,GFSH)按照分子量大小进行分离,获得5个不同分子量的草鱼鳞酶解产物,(<1 k Da:GFSH1;1~3 k Da:GFSH2;3~5 k Da:GFSH3;5~10 k Da:GFSH4;>10 k Da:GFSH5)。对比5个不同分子量的GFSH对嗜热链球菌的生长的影响。结果表明GFSH1即分子量小于1000 Da的草鱼鳞酶解物能够更好地促进嗜热链球菌增殖,且使得嗜热链球菌在对数生长期的增殖速度更快,产酸能力也较其他4个分子量的GFSH更好。此外,对不同分子量的GFSH的体外抗氧化活性进行探究,实验结果表明,GFSH1即分子量小于1000 Da的草鱼鳞酶解产物具有良好的体外抗氧化活性。3嗜热链球菌胞外多糖的提取与体外抗氧化活性的研究利用膜分离得到的5种不同分子量的GFSH,探究其对嗜热链球菌胞外多糖产量的影响。结果发现GFSH1作为氮源时,嗜热链球菌在生长48 h后产生的胞外多糖最多,达到111.4 mg。此外,通过对去除合成培养液中蛋白质的条件进行优化,得到去除合成培养液中蛋白质的最优条件为:三氯乙酸添加量5%,离心力15000rpm,离心时间30 min。最后对嗜热链球菌胞外多糖的体外抗氧化活性进行研究,实验结果表明,嗜热链球菌胞外多糖具有良好的体外抗氧化活性。
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