背景:早产儿脑白质损伤(white matter damage,WMD)是儿童脑瘫和智障的主要原因之一,目前仍无特效疗法。少突胶质前体细胞(Oligodendrocyte Precursor Cells,OPC)是中枢神经系统(Central Nervous System,CNS)天然的成髓鞘细胞,移植体外扩增培养的OPC给髓鞘再生带来了希望,但目前仍存在一个瓶颈问题—OPC移植到WMD模型大鼠脑内后分化与髓鞘再生困难严重限制了其快速走向临床应用。多项动物试验证实尽管移植的OPC能够迁移至损伤区域并长期存活,但绝大多数细胞并不能分化为成熟少突胶质细胞(Oligodendrocytes,OL),而是保持在前体细胞阶段。因此,良好的体内分化及髓鞘再生是实现高效髓鞘再生能力的必要保障。目的:1、研究咪康唑对早产儿WMD模型大鼠胼胝体部髓鞘的保护作用;2、探讨咪康唑对早产儿WMD模型大鼠神经行为功能的影响;3、研究咪康唑促进OPC分化和髓鞘形成的机制研究。4、探讨咪康唑对体外培养人OPC的影响;方法:1、选择新生3日龄SD大鼠,采用结扎右侧颈总动脉,缺氧80分钟的方法制作早产儿WMD模型。采用咪康唑腹腔注射治疗早产儿WMD模型大鼠。苏木精-伊红(HE)染色和髓鞘碱性蛋白(Myelin Basic Protein,MBP)免疫组织化学染色对模型进行鉴定,同时,MBP免疫组织化学染色及Western Blot检测脑白质MBP的量,超微结构电镜观察髓鞘超微结构的改变;2、于生后28天,悬吊试验、斜坡试验及旷场试验进行神经功能行为学检测;3、Western blot法检测体内外环境下ERK和p-ERK的表达量;4、从人胚胎脑组织分离培养出神经干细胞(Neural Stem Cells,NSC),诱导分化为OPC。显微镜下观察OPC的细胞形态特征,免疫荧光染色进行细胞鉴定。咪康唑和磷酸化抑制剂分别干预体外培养的OPC,然后通过CCK-8法检测咪康唑是否具有促进OPC生长增殖的作用,MBP/CC1免疫荧光染色验证咪康唑是否可以诱导OPC分化为成熟的OL。结果 1、HE染色和MBP免疫组织化学染色证实我们成功建立了早产儿WMD模型;经咪康唑治疗后,胼胝体部MBP表达量显著提高(P<0.05),且缺血缺氧所致的髓鞘脱失和髓鞘厚度降低得到明显改善;2、咪康唑干预组悬吊试验、斜坡试验及旷场试验明显优于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.05);3、Western Blot证实咪康唑显著增加磷酸化ERK(p-ERK)的表达,而磷酸化抑制剂则降低其表达水平;4、我们成功将NSC诱导分化为OPC。OPC胞体呈椭圆形或圆形,具有典型的双极突起,少数呈三极突起;细胞表达Sox10,PDGFα,04,GAIC阳性;咪康唑不仅促进OPC的生长增殖,而且提高了OPC的细胞纯度;然而,MBP/CC1染色未发现OPC分化为OL。结论:咪康唑通过促进髓鞘的形成保护缺血缺氧诱导的早产儿WMD。