【摘 要】
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妊娠的关键事件主要包括精卵结合、胚胎植入、子宫内膜基质细胞蜕膜化、胎盘发育等。其中蜕膜化的子宫内膜基质细胞可以在胎盘成功建立之前为成功植入的胚胎提供足够的营养物质。此外,蜕膜化的基质细胞还能够保护胚胎免受母体免疫细胞的攻击,从而实现胚胎的免疫豁免。人子宫内膜基质细胞(HESCs)在发生蜕膜化前具有一个增殖的过程,而后HESCs在体内雌孕激素的作用下分化成为蜕膜细胞。研究显示,cAMP-PKA信号通
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妊娠的关键事件主要包括精卵结合、胚胎植入、子宫内膜基质细胞蜕膜化、胎盘发育等。其中蜕膜化的子宫内膜基质细胞可以在胎盘成功建立之前为成功植入的胚胎提供足够的营养物质。此外,蜕膜化的基质细胞还能够保护胚胎免受母体免疫细胞的攻击,从而实现胚胎的免疫豁免。人子宫内膜基质细胞(HESCs)在发生蜕膜化前具有一个增殖的过程,而后HESCs在体内雌孕激素的作用下分化成为蜕膜细胞。研究显示,cAMP-PKA信号通路具有起始蜕膜化的作用,但在蜕膜化的起始阶段,PKA激活后通过磷酸化哪些底物蛋白发挥作用以及具体的调控机制尚未清楚。为了探索cAMP-PKA在诱导HESCs蜕膜化起始阶段中的具体分子机制,我们利用HESCs体外诱导蜕膜化模型进行了相关的研究。在给予蜕膜化刺激(cAMP和P4)24小时后,利用基序特异抗体富集潜在的PKA底物,通过质谱鉴定出了富集组分中的多种蛋白,本研究选取RNA解螺旋酶DDX5作为主要研究对象。利用siRNA在基质细胞中敲降DDX5后,通过MTS检测发现HESCs增殖速度显著低于对照组;运用免疫荧光检测发现,敲降DDX5/17后,Ki67信号阳性的细胞比率明显下降。实验说明敲降DDX5/17后抑制HESCs的增殖。敲降DDX5/17后,q-PCR和WB的结果显示,在cAMP和P4诱导分化过程中标志分子PRL和IGFBP1的诱导水平明显降低,敲降组与对照组相比没有发生明显的蜕膜化诱导的上皮样形态学改变,说明DDX5参与调控子宫内膜蜕膜化过程。初步的机制研究发现,敲降DDX5后蜕膜化起始阶段FOXO1的表达异常,说明DDX5可能通过调控FOXO1的表达参与了蜕膜化的发生。综上所述,本研究揭示了 RNA解螺旋酶DDX5在蜕膜化进程中的作用。
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