目的:研究肌酸对缺氧H9C2心肌细胞GLUT4转位的影响,旨在进一步探索改善和调控缺氧心肌细胞能量代谢的因素,以对缺血/缺氧心肌的保护提供理论依据。方法:采用分化培养的H9C2心肌细胞为研究对象,利用叠氮钠(特异性细胞色素C氧化酶抑制剂)模拟心肌细胞化学性缺氧。测定不同浓度及作用时间的肌酸溶液对H9C2心肌细胞2-[3H]脱氧葡萄糖平均摄取率的影响,确定实验所需肌酸浓度和作用时间。分化培养的H9C2心肌细胞被随机分为对照组、化学性缺氧组、肌酸组、化学性缺氧加肌酸组,然后利用差速离心及蔗糖密度梯度分离出细胞膜和细胞内膜,再用蛋白质印迹杂交法分别测定膜组分中GLUT4的表达,并进行比较。结果:肌酸浓度为0.5mmol/L、作用时间为2.5 h时,细胞对2-[3H]脱氧葡萄糖摄取率达峰值;随肌酸浓度增高,作用时间延长,细胞对2-[3H]脱氧葡萄糖摄取率不再增加。蛋白质印迹杂交分析结果表明,同对照组相比,各处理组细胞膜GLUT4表达量明显增加;同时,细胞内膜GLUT4表达量相应下降,提示各实验组GLUT4在不同程度上发生了从细胞内膜向细胞膜的转位(P<0.05)。其中,化学性缺氧加肌酸组发生最大程度转位,且同其他各组相比差异具有显著性(P<0.05);而化学性缺氧组和肌酸组之间比较差异无显著性(P >0.05)。结论:化学性缺氧单独或加入肌酸诱导H9C2心肌细胞GLUT4发生不同程度从细胞内膜向细胞膜的转位,其中化学性缺氧加肌酸组发生最大程度转位。可见,肌酸能够增加缺氧组GLUT4转位。