【摘 要】
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本课题以公鸡为试验动物,在日粮中添加一定浓度的氟及硒与氟,复制公鸡氟中毒及硒颉颃模型。通过对试验鸡临床表现、剖检变化、病理组织学观察、凋亡现象以及睾丸组织p53、Caspa
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本课题以公鸡为试验动物,在日粮中添加一定浓度的氟及硒与氟,复制公鸡氟中毒及硒颉颃模型。通过对试验鸡临床表现、剖检变化、病理组织学观察、凋亡现象以及睾丸组织p53、Caspase-3mRNA的表达等指标的测定,探讨硒颉颃氟致公鸡生殖毒性的效应。研究结果表明:1.氟可影响公鸡体内抗氧化系统功能,使血清和睾丸中GSH-Px、SOD活性降低,MDA含量升高,构成了氟损伤机体的病理学基础。加硒后可提高GSH-Px、SOD活性,降低MDA含量,说明硒能颉颃氟对公鸡抗氧化损伤作用。2.氟能降低血清中睾丸酮、促卵泡生成激素、雌二醇和生长激素的含量,增加黄体生成素含量,加硒后可使血清中睾丸酮、促卵泡生成激素、雌二醇和生长激素含量增加,使黄体生成素含量降低。3.通过原位末端标记检测和组织超微结构观察,发现氟中毒可引起公鸡睾丸组织细胞凋亡,加硒后可减少此作用,说明硒能颉颃氟引起公鸡睾丸组织细胞的凋亡。4.通过对睾丸微观结构和超微结构的观察,证实氟引起线粒体、内质网及细胞核等的损伤,破坏血睾屏障,导致间质细胞、支持细胞、生精细胞的坏死或凋亡,硒能减轻氟对细胞器的损伤。5.应用碱性单细胞凝胶电泳测定和DNA Ladder分析氟对生殖细胞DNA的损伤效应,结果表明氟能够引起公鸡生殖细胞DNA损伤,硒能减轻氟对生殖细胞DNA的损伤,说明硒能颉颃氟致公鸡生殖细胞的损伤。6.应用半定量RT-PCR法检测了鸡生殖细胞内p53、Caspase-3mRNA表达水平,结果表明氟能增加生殖细胞内p53、Caspase-3mRNA的表达水平,进而诱导生殖细胞凋亡,硒能颉颃氟所致的生殖细胞p53、Caspase-3mRNA表达量的增加,进而减轻氟所致生殖细胞的凋亡。本试验从器官、细胞、亚细胞和分子水平上探讨氟致公鸡生殖功能毒性的作用,揭示了硒能颉颃氟所引起的生殖细胞活性降低、氧化应激诱发、细胞DNA损伤、细胞内基因表达增加、细胞凋亡增加,硒颉颃试验组公鸡与氟中毒试验组公鸡在病理组织学上改变的差异为判断和分析氟中毒以及评价硒颉颃效应提供了充分的病理组织学依据。上述结果为判断和分析氟及硒颉颃效应提供了理论依据,对畜禽氟中毒的防治具有重要意义。
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