【摘 要】
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新型隐球酵母是人体条件致病真菌,它主要感染免疫缺陷个体,比如AIDS患者,器官移植者和高剂量激素治疗者。新型隐球酵母拥有三个主要的致病因子：漆酶,荚膜和人体体温（37℃）生活能力,其中漆酶是研究得最多和最彻底的致病因子。漆酶是一个细胞壁酶,它具有氧化多种多酚底物和金属底物的能力。新型隐球酵母中存在着两个漆酶同源基因,LACl和LAC2。葡糖糖饥饿会诱导漆酶表达,并且该表达主要来自LACl基因。
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新型隐球酵母是人体条件致病真菌,它主要感染免疫缺陷个体,比如AIDS患者,器官移植者和高剂量激素治疗者。新型隐球酵母拥有三个主要的致病因子：漆酶,荚膜和人体体温（37℃）生活能力,其中漆酶是研究得最多和最彻底的致病因子。漆酶是一个细胞壁酶,它具有氧化多种多酚底物和金属底物的能力。新型隐球酵母中存在着两个漆酶同源基因,LACl和LAC2。葡糖糖饥饿会诱导漆酶表达,并且该表达主要来自LACl基因。 天然反义链转录产物（NATs）是细胞内源的RNA分子,它们可以和其他转录产物配对。反义链是相对于正义链而言的,正义链在细胞中的主要作用是翻译合成蛋白以维持细胞的结构和功能,而反义链属于非编码RNA家族,在细胞中主要起到调控基因表达的作用。根据来源不同,NATs可以分为顺式-NATs和反式-NATs。顺式-NATs是由同一基因座位上的反义DNA链转录而来的；而反式-NATs则来自于不同于正义链的基因座位。在真核生物,特别是动物细胞中,顺式-NATs是反义链RNA的主要形式,而在原核生物中大部分是反式的。但是迄今为止,在真菌中关于NATs的报道还是比较少的。 在本论文中,我们发现新型隐球酵母中存在反义LAC1 （ALAC1）的转录产物。从目前获得的1871bp的ALAC1片段长度看,它和同一基因座位上的正义LAC1 （SLAC1）完全互补配对,但是3’-末端没有poly（A）-尾并可能存在某种修饰。接着,我们通过实时定量PCR发现无论是在新型隐球酵母的4种不同突变株中,还是在4种不同培养条件下,ALAC1和SLAC1的转录都是正相关的,并且ALAC1的转录量总是小于SLACl。最后,我们将trans形式的ALAC1表达载体转入酵母,发现过量表达的ALAC1造成了漆酶基因表达的“沉默”,这说明体内环境中,SLAC1和ALAC1的转录存在着某种平衡,并且天然ALAC1的表达是cis型的。
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