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本研究设计两个试验考察了pGRF基因质粒与猪生产性能、蛋白质营养及激素分泌的关系,探索了pGRF基因质粒促进猪生长与调控猪蛋白质代谢利用的机理。 试验一 选用30头长白×太湖仔猪(起始体重5.07kg),随机分为5组,分别注射0、0.25、0.5、1.0及2.0mg pGRF基因质粒,饲喂同一饲粮(DE:14.28MJ/kg、CP:23.98%),考察了5-10kg阶段的生产性能。试验猪体重达7kg时,每组选体重与组平均体重接近、生产性能近似的2个重复(4头试猪)进行N平衡试验,N平衡试验第三天引入15N-Gly进行同位素示踪试验,运用三库模型考察了体蛋白质、氨基酸代谢动力学参数的变化规律及其代谢利用效率。N平衡试验结束当天采血,用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测血液中的GRF、IGF-I浓度,用放射免疫分析方法检测血液中的GH、SS浓度,用GOD-POD法、脲酶波氏比色法、不去蛋白终点比色法、GPO-POD法分别测定血液中的GLU、BU、CR、TG。 结果表明:注射pGRF基因质粒明显提高试验猪生产性能。注射剂量不同对猪生产性能影响不同。1.0mg组比对照组终体重增加20%(11.22kg vs9.36kg,P<0.01)、日增重提高43%(0.256kg vs 0.179kg,P<0.01)、耗料增重比降低14%(1.51 vs 1.76,P<0.05)、日采食量增加23%(0.386kg vs 0.314kg,P<0.05)。pGRF基因质粒用量与试验猪终体重和日增重呈极显著二次曲线关系(P<0.01),与日采食量呈极显著三次曲线关系(P<0.01),与耗料增重比呈显著三次曲线关系(P<0.05)。低剂量pGRF基因质粒使采食量、耗料增重比增加,高剂量则趋向降低。 适宜利用pGRF基因质粒明显增加猪体内N沉积量(1.0mg组增加58%,P<0.01),提高N沉积率(1.0mg组提高31%,P<0.01)。基因质粒对N消化吸收率影响不明显。 pGRF基因质粒改变了猪蛋白质及氨基酸动态代谢平衡,显著提高N利 川效率。其川聂与代谢效应参数呈显著或极显茗的二次曲线关系(P<0刀5 或 P<0.of人 l.oms nGRF基因质粒使氨基酸代谢库容量增 )JO 3.sgN几。75. (P<0*1),N流显增加1.sg*从gw’乃.(P<0*1),蛋白合成速率增加37% (P<0.01),降解迭率增加36O(P<0.of),蛋白质沉积速率增加380(P<0.of), 蛋白用转速率增加36.*%(P<O.05),内源尿氮卅泄谈率降低25%(P<O.OS), 氨基酸重复利用速率提高45%(P叩刀5X 氨基酸重复利用率提高6% (P<0刀5),消化氨基酸合成蛋白速率增加13.3%(P<O.05),消化氨基酸氧 化速率降低 42.40(P<0.of),氨基酸表观利用效率提高 290(P<0.of),氨 基酸冰利用效率提高川%(r<0.01人pGm’丛!习质粒促进蛋白沉积的增加 伴随着蛋白合成与降解加速、周转代谢强度加强、氨基酸重复利用效率及食 入氨基酸利用效率提高及内源尿N排泄与食人氨基酸氧化减少。 注射…*F基因质粒使血液中**F升高1石倍门刀*g:o.5723叩加Ivs omg:0.3600ng/ml,P<0刀5)、GHn·高 2.5{(L0ing:0.9465ng/ml vs omg: 0.3992:g/二!,P<0刀1》气!GF*了l;亨:J 2.3俯(l刀1fig:86.758fig/1lll VS Olllg: 40.320fig/1111可 I)<0.01))⑤ Jfl:-泄IDI GIZI了浓仪l弛质粒注射凤JODll 而JROll,二二者 呈极显著线们j三u关(y=0.1709X+0.3628,T-0.9240”“,R‘-0.9549,y:GRF 浓度,X:剂员人 pGRF质粒注射显与]fll。浆 Gfl !II显著二次!Ill线关系o刃刀5), 与 IGF-I浓度呈极显著二次 l山线关系(P<0.of),与%浓度呈极显著三次曲 线关系(P<0刀1人高剂量叩*F基因质粒使血浆中SS显著上升(P<0刀5人 抑制GH分泌。p**F基因质粒显著改变血液中尿素浓度,1刀mg组比对照 组降低 200(P<0.05)。l.0Illg pGRF b茎二!质粒攸血液 TG明显下降(P<0.05), 捉示丛囚质粒攸狈脂肪代谢发生改变。 注射pGI仆丛囚质粒后,*.浆IG卜1浓度’。IH采食显门*T)是介导猪 l”11YI重(ADG)Jtyjll的重要Ikl%;(ADG二0.0432+0.0017 IGF-I+0.95 INT, *一0.8N””,才一0.764)。]m浆IG 卜1浓度是D }耗料增重比(尸C)的重要 因子(F/G一2.193-0.0083IGF-I,R-0.853**,R‘一0.728)。血浆 GRF浓度与日 采食量 (IN)呈二次汕线关系(IN—0.1977+二卫415 GRFZ刀992 GRF‘, 才一0556,P<O刀5)。 IGFI介导猪氨基酸代谢库容量、N流量、蛋白合成速率、周转速率、 氮基酸重复利用速率、氮某酸重复利用率、氨基酸表观利用效率、氨基酸净 .2. 利用效率、内源尿N排泄速率的改变。生长嫩素与N食入量增加决定蛋白