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背景: 疥螨隶属于真螨目、疥螨科、疥螨属,是一种永久性寄生螨。常寄生于人和其他哺乳动物皮肤表皮内,引起疥疮(又称疥癣、癞病),一种顽固性、接触性、传染性皮肤病。两位意大利学者在1689年对疥螨病进行了首次描述。疥螨过敏是一种很重要的人畜共患病,呈世界性分布,世界各国均报道过大量的病例。而随着近年来,猫狗成为家庭宠物的兴起,这些动物大量、大范围地进入到城市居民的家庭,并且最近两年来,宠物亲昵文化在国内的盛行,猫狗在最初防盗防鼠的角色已发生很大转变,很多城市居民已视其为家庭成员,因此与猫狗的接触更为直接和亲近,这一方面体现随着人民群众生活水平的提高,人文关怀和平等博爱的观念更加深入人心,另一方面随着猫狗等动物更加靠近人类的生活范围,这些动物本身的疾病和人畜共患病对人类健康的影响更应该引起关注。 目的: 通过分子克隆和基因工程的技术,原核表达疥螨主要过敏原组分1Sars14蛋白,为疥螨的单克隆抗体制备、低过敏原性疫苗和过敏原性评价等后续一系列实验研究提供必需的实验原材料。 方法: 1.通过对Sar s14的mRNA序列进行密码子优化并对Sar s14蛋白进行全基因合成。 2.构建以Rosetta为宿主菌,pET-44a为表达载体的原核表达系统,对Sar s14进行蛋白表达。 3.对Sars14进行蛋白表达产生的一系列问题进行实验探究。 结果: 1.获得经过密码子优化后的Sars14全基因序列。 2.获得Sar s14重组蛋白。 3.对Sar s14重组蛋白结果进行了实验探究。 结论: 本研究首先在国内获得了动物疥螨主要过敏原成分一Sar s14重组蛋白,并通过了鉴定实验验证,对最后重组蛋白出现两条目的带的原因,进行多方面,多角度的实验性探讨,但还需要更进一步实验来证明Sar s14重组蛋白出现两条带的成因。