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背景和目的:乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,严重影响女性的生命健康。乳腺癌是典型的内分泌疾病,与雌激素分泌失调有关。目前,除外科手术和放射治疗外,临床上对乳腺癌治疗主要采用对抗雌激素的内分泌治疗。本课题对新型选择性雌激素受体调节剂ER520进行体外和体内的生物学活性评价,为其进一步的开发研究奠定基础。方法:分别培养人乳腺癌细胞MCF-7,人子宫内膜癌细胞Ishikawa和人脐静脉血管内皮细胞HUVEC用于初步评价ER520的体外和体内抗肿瘤药效。不同浓度ER520作用于细胞后,蛋白印迹法分析MCF-7和Ishikawa细胞中ERα和ERβ蛋白的表达情况;MTT法测定MCF-7和Ishikawa细胞的增殖能力;细胞划痕实验检测MCF-7、Ishikawa和HUVEC细胞的迁移能力;细胞粘附实验评价MCF-7和Ishikawa细胞的体外粘附人工基底膜的能力;Transwell小室研究MCF-7和Ishikawa细胞转移和侵袭能力;流式细胞术观察MCF-7细胞的正常细胞周期的阻滞;ELISA测定MCF-7和Ishikawa细胞的培养上清液中VEGF的浓度的变化;小管形成实验分析HUVEC细胞血管样结构的完整度和相对数量的变化;建立鸡胚绒毛尿囊膜模型观察绒毛尿囊膜的新生血管分化情况。肿瘤组织块接种法建立裸鼠乳腺癌移植瘤模型,腹腔给药方式治疗,给予荷瘤裸鼠ER520 5mg/kg、对照药2-甲基雌二醇25mg/kg和他莫西芬5 mg/kg。静脉给药方式治疗,给予荷瘤裸鼠ER520 10mg/kg和5mg/kg,对照药他莫西芬5mg/kg,研究ER520体内抗肿瘤能力,观察瘤体生长情况,绘制肿瘤的生长曲线。结果:1.0.1 μmol/L 到 10μmol/L 浓度范围内,ER520 减少 MCF-7 和 Ishikawa 细胞中ERα蛋白的相对表达水平,与空白组比较差异有统计学意义(p<0.05);增加两个细胞株中ERβ蛋白,与空白组比较差异有统计学意义(p<0.05);2.ER520呈浓度依赖性抑制MCF-7和Ishikawa细胞的增殖,IC50分别为35.1±2.5和 7.9±2.1 μmol/L;3.ER520扰乱MCF-7细胞正常细胞周期,分布于M期的细胞比例增加,MCF-7细胞分裂过程阻滞于G2/M期;4.ER520抑制细胞的活动能力,减缓MCF-7和Ishikawa细胞的迁移速度,与空白对照组对比差异有统计学意义(p<0.05);ER520抑制MCF-7和Ishikawa细胞粘附于仿生的基底膜上,减少粘附细胞的数量,ER520处理组和未处理组差异有统计学意义(p<0.05);ER520抑制MCF-7和Ishikawa细胞穿越Transwell小室基底膜胶和高分子膜,导致穿过上室的细胞数量减少,ER520处理组和未处理组差异有统计学意义(p<0.05);5.ER520降低MCF-7和Ishikawa细胞培养液中VEGF浓度,与对照组相比差异有统计学意义(p<0.05);与对照组相比,ER520组HUVEC细胞的迁移速度减慢,迁移率差异有统计学意义(p<0.05);ER520减少HUVEC细胞血管样小管结构的形成,与对照组相比差异有统计学意义(p<0.05);6.建立鸡胚绒毛尿囊膜模型,0.3μg/mL,1.5μg/mL和3μg/mL三个浓度的ER520,均可不同程度地减少新生血管数目;7.成功建立裸鼠乳腺癌移植瘤模型,腹腔注射给药治疗四周后,ER520治疗组、阳性对照治疗组与阴性对照组比较,肿瘤体积和重量差异均有统计学意义(p<0.05)。以空白组为对照,ER520组的肿瘤体积(瘤重)抑制率为48.5%(40.3%),2-甲基雌二醇的抑制率为46.3%(34.0%),他莫西芬的抑制率为36.9%(19.9%),ER520组的肿瘤抑制率与2-甲基雌二醇抑制率差异无统计学意义,与他莫西芬肿瘤抑制率比较差异有统计学意义(P<0.05);8.静脉注射治疗,给药四周后,ER520治疗组、阳性对照他莫西芬治疗组与阴性空白对照组比较,肿瘤体积和瘤重量差异均有统计学意义(p<0.05);以空白组为对照,ER520 10mg/kg组的肿瘤体积(瘤重)抑制率为57.5%(58.3%),ER5205mg/kg组的抑制率为50.9%(52.3%),他莫西芬的抑制率为34.4%(34.5%),ER520两个剂量组与他莫西芬肿瘤抑制率比较差异有统计学意义(p<0.05);结论:1.ER520下调MCF-7和Ishikawa细胞中ERα蛋白的表达水平,同时上调两个细胞株中ERβ蛋白水平;2.体外条件下,ER520能够抑制MCF-7和Ishikawa细胞增殖、粘附基底膜、迁移和侵袭,阻滞MCF-7细胞周期在G2/M期,扰乱肿瘤细胞的基本功能,有抗肿瘤转移的潜力;3.ER520抑制MCF-7和Ishikawa细胞分泌VEGF,限制HUVEC细胞的迁移,减少HUVEC细胞血管样结构产生,体外条件下有抗血管生成的潜力;4.ER520抑制鸡胚绒毛尿囊膜上新生血管数目,有体内抗血管生成的潜力;5.裸鼠体内的药效研究显示,腹腔注射给药,ER520 5mg/kg抑制乳腺癌肿瘤的生长,肿瘤抑制率与2-甲基雌二醇无显著性差异,优于他莫西芬的抗肿瘤作用。静脉注射给药,ER520 5mg/kg和10mg/kg均有明显的肿瘤抑制作用。