霍山石斛是名贵的中药材,其中含有大量的生物活性物质,比如多糖、多酚和石斛碱等。大量研究表明,酚类化合物具有极强的抗氧化作用,能有效地清除人体内过多的活性氧,减缓机体衰老。同时,酚类化合物还具有抗炎,抗肿瘤等功能,也能调节人体肠道系统,改善肠道菌群的生长状态。目前对多酚类化合物的益生和抑菌作用少有报道,本文对霍山石斛多酚的提取工艺进行了考察,并利用大孔树脂对霍山石斛多酚进行了分离纯化,探讨了多酚类化合物的抗氧化活性以及对益生菌和致病菌的作用。结果如下:1、霍山石斛多酚的提取条件优化对比了不同溶剂对多酚提取量的影响,发现蒸馏水对多酚的提取量要高于其它有机溶剂,之后用单因素工艺优化的方法考察了浸提过程中的时间、温度、料液比和pH。在通过响应面优化后最佳条件为提取时间50 min、提取温度60℃、料液比为1:70(g:mL)和提取液pH值为4,在此条件下霍山石斛多酚的得率为10.14mg/g。2、大孔树脂分离纯化霍山石斛多酚AB-8树脂可作为霍山石斛多酚的吸附剂,最佳纯化条件为:静态吸附150 min即达到饱和,多酚溶液pH为4.0,浓度为2.0 mg/mL,上样流速为1.0 mL/min,洗脱流速为1.0 mL/min,总酚的纯度为76.2%。通过乙醇溶液的梯度洗脱,获得了 4个洗脱组分,分别为DHPoly-1、DHPoly-2、DHPoly-3、DHPoly-4。3、霍山石斛多酚的抗氧化和益生及抑菌作用从超氧自由基清除、ABTS自由基清除、DPPH自由基清除和总还原力4个指标考察了 4个洗脱组分的总抗氧化能力,结果显示,4个组分对超氧阴离子的清除率分别为59.05%、51.17%、68.79%、64.91%和ABTS自由基的清除率分别为83.78%、77.52%、93.18%、90.28%。清除能力较强,总的还原力 DHPoly-3>DHPoly-4>DHPoly-1>DHPoly-2,对DPPH自由基的清除率较弱且差异不显著,总的抗氧化能力 DHPoly-3>DHPoly-4>DHPoly-1>DHPoly-2。通过最小抑菌浓度(MIC)和抑菌半径的测定判断并分析霍山石斛多酚组分对致病菌的抑制作用,当DHPoly-3组分的浓度在0.25 mg/mL和0.125 mg/mL时分别对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌有抑制作用,抑菌半径分别为3.6 mm和4.1mm;分析了霍山石斛多酚组分加入培养基对益生菌的生长状况,比较各组分之间的差异。4个组分均具有促进益生菌和抑制致病菌生长的作用,其中以DHPoly-3组分的效果最佳。