DNA-PKcs反义寡核苷酸对不同p53功能状态的鼻咽癌细胞株放射敏感性的影响

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目的:该实验通过转染DNA-PKcs反义寡核苷酸入p53功能正常和异常的鼻咽癌细胞株,干扰DNA-PKcs的mRNA翻译过程,观察特异性地抑制DNA-PKcs蛋白表达对鼻咽癌细胞放射敏感性的影响.方法:用Western blot法检测转染了野生型p53基因和未转染野生型p53基因的鼻咽癌细胞株CNE-1和CNE-2内p21蛋白的表达;利用Lipofectamine2000作为载体把DNA-PKcs反义寡核苷酸转染进鼻咽癌细胞CNE-1和CNE-2中,特异性地抑制DNA-PKcs表达;用集落形成法分析转染DNA-PKcs反义寡核苷酸后细胞的存活情况;用线性二次模型和单击多靶模型拟合求出放射生物学参数α、β、α/β、SF<,2>、D<,0>、D<,q>和N,评价转染DNA-PKcs反义寡核苷酸后放射敏感性的变化.结论及意义:未转染野生型p53基因的CNE-1及CNE-2细胞在阿霉素处理前后,p21蛋白表达变化不明显,提示p53功能缺陷.而转染了野生型p53基因的细胞株AW、BW,经阿霉素处理,细胞的p21蛋白表达均明显上调,说明细胞获得了正常的p53功能;转染DNA-PKcs反义寡核苷酸后,不论p53功能是否正常,各鼻咽癌细胞株的α值均增大,SF<,2>、D<,0>和D<,q>值均减少,说明DNA-PKcs反义寡核苷酸可提高不同p53功能状态鼻咽癌细胞株CNE-1、CNE-2的放射敏感性.
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