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肝脏疾病是全世界面临的一个重要问题,其发病范围广,受感染人数多,却只有为数不多的药物能成功运用于人类肝脏疾病的治疗。因此,人们迫切需要寻找效果好且安全无毒的天然护肝药物。桂花浸膏是一种常见的食品添加剂,本研究组成员前期研究发现桂花浸膏具有很好的保护化学性肝损伤的作用,但因该其护肝成分及其护肝机制不清楚,且缺少相关的药学研究,因而无法将其研制成为有效成分结构明确、作用机理清楚的护肝药物或功能性食品。本文将通过系统研究,确认桂花浸膏中的护肝主要成分及其护肝作用机制,并对护肝成分开展药理学研究,包括药物代谢动力学、药物代谢及药物相互作用等,为设计和优化研究给药方案及药物临床前研究提供理论依据,对发展更为安全有效的天然护肝药物具有极其重要的意义。主要获得以下研究结果：(1)研究了桂花浸膏中纯化产物的护肝效果。从桂花浸膏中分离纯化出其主要成分并鉴定为连翘脂素(Phillygenin, PHI),并建立CCl4诱导的化学性肝损伤小鼠动物模型,考察了PHI的护肝效果。结果表明,PHI各剂量组均可不同程度的降低血清中ALT和AST水平,降低肝匀浆中MDA含量,提高SOD活性,其药效与阳性对照药物相似。病理切片结果显示,PHI各剂量组对小鼠肝脏组织的肝细胞病变及炎性细胞浸润均具有很好的治疗效果；(2)研究了PHI护肝的主要作用机理,发现PHI对CCl4主要代谢酶CYP2E1具有明显的抑制作用,其Ki值为0.44μmol/L。考察PHI的体外抗氧化活性,发现PHI可以有效清除氧化自由基,其对ABTS自由基的清除能力优于阳性药物抗坏血酸。表明PHI可能是通过抑制CYP2E1活性及其抗氧化清除自由基以达到保护化学性肝损伤的目的；(3)研究了PHI在小鼠体内的药物代谢动力学。口服灌胃PHI后,PHI能够快速吸收,并在30min达到浓度峰值Cmax为0.7μg/mL, PHI分布到各组织的速度较慢,其吸收、分布和消除半衰期分别为54.8,150和240分钟,血浆清除率为345mL/(min·kg)。静脉注射给药后能快速分布到小鼠各组织器官,其分布半衰期为3.78min,血浆清除率为156mL/(min·kg)。PHI的生物利用度为57.4%,表明PHI具有较好的口服生物利用度；(4)研究了PHI在大鼠体内和体外的代谢产物并考察了其在不同种属间的代谢稳定性。采用UPLC-MS/MS技术检测到PHI在大鼠体内和体外的的代谢产物相同,均为羟基化及甲基化代谢产物。PHI的代谢稳定性考察,发现其在小鼠、大鼠、狗和人类肝微粒体中的半衰期很长(>1h),在猴肝微粒体中的代谢半衰期为54min。实验结果表明,PHI在不同种属间的代谢稳定性较好,推测PHI在体内主要以原型药物形式存在；(5)研究了PHI与人血浆的蛋白结合率以及与人血浆中含量最为丰富的蛋白即人血清白蛋白(HSA)之间的相互作用。PHI与人血浆的蛋白结合率实验结果表明,PHI在低浓度(10-20μmol/L)时与血浆的蛋白结合率大于90%。二者之间发生了静态猝灭,其复合物的稳定主要通过范德华力和氢键的作用力,金属离子和乙醇会降低PHI与HSA的结合,从而增加游离的PHI浓度；(6)考察了PHI对人类主要肝脏细胞色素CYP450酶的抑制和诱导作用。发现PHI能抑制细胞色素CYP2E1(Ki=0.44μmol/L)及CYP3A4(Ki=6.5μmol/L)的活性。PHI对细胞色素CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19和CYP3A4酶的活性和蛋白表达均无明显诱导作用。