【摘 要】
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中国香菇种质资源丰富,生产规模较大,但在生产中却存在着品质较差、菌种退化、专用加工品种缺乏的问题。多糖作为香菇主要活性成分,对其分子调控机理研究尚处于起步阶段。研究香菇种质资源多样性是菌株选育和新品种开发的前提和基础。本研究从全国各地广泛收集香菇推广菌株53份、野生资源22份,共计75份。通过田间栽培试验观测不同香菇菌株的表型性状,利用ITS、ISSR技术分析菌株的遗传多样性,通过化学分析测定菌株
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中国香菇种质资源丰富,生产规模较大,但在生产中却存在着品质较差、菌种退化、专用加工品种缺乏的问题。多糖作为香菇主要活性成分,对其分子调控机理研究尚处于起步阶段。研究香菇种质资源多样性是菌株选育和新品种开发的前提和基础。本研究从全国各地广泛收集香菇推广菌株53份、野生资源22份,共计75份。通过田间栽培试验观测不同香菇菌株的表型性状,利用ITS、ISSR技术分析菌株的遗传多样性,通过化学分析测定菌株在菌丝阶段和子实体阶段的多糖含量,并评价了不同碳氮源和温度对香菇尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶（UGPase）、漆酶（Laccase）酶活及其调控基因转录表达特征的影响,为进一步选育优质加工型香菇品种和优化香菇栽培提供理论依据。主要结果如下:（1）生长速度测定结果显示菌株52（725）的菌丝生长速度最快（0.82 cm/d）,其次是菌株51（江西香菇）。田间栽培试验显示:受高温天气的影响崇州基地出菇情况较差,多为畸形菇。泸定温度适宜,更适合香菇的生长,出菇情况较好,菇形圆整厚实。整体上看,引进资源出菇情况优于野生菌株,引进资源子实体农艺性状较好,而野生菌株抗逆性、抗污染率高、出菇情况差、子实体外型均表现较差。（2）香菇菌株在菌丝体和子实体阶段多糖含量存在明显的差异。12个菌株的菌丝体多糖含量高于4.0%,其中野生菌株74（冕宁浅灰）菌丝体含量最高（6.0%）,其次是引进资源45（931-9）（5.8%）。4个菌株的子实体多糖含量高于4%,其中菌株3（广香2044）的子实体含量最高（5.3%）,其次是菌株26（苏选615）（4.3%）,野生资源的子实体多糖含量明显低于引进资源菌丝体多糖含量。（3）系统发育分析显示:75株香菇菌株表现出明显的遗传多样性,基于ITS序列构建的系统发育树中菌株57（LDT11-77）和60（LDT2011.2）相似度达到99%。供试菌株在在0.62的相似水平上聚为一类;在0.74的水平上,供试菌株大致分为6类。（4）不同碳氮源对香菇菌丝体胞内多糖含量、UGPase酶活及其调控基因相对表达量的影响研究结果表明:香菇菌丝UGP基因表达量、UGPase酶活以及菌丝胞内多糖间存在明显的正相关关系。以小分子糖（蔗糖、麦芽糖和甘露糖）为碳源、有机复合物（麦麸和黄豆芽）为氮源时,UGP基因的相对表达量明显上调,UGPase酶活性更高,菌丝胞内多糖含量也明显提高。其中蔗糖和麦麸处理下的UGP基因表达量、UGPase酶活性和菌丝胞内多糖含量最高。小分子碳源（蔗糖、麦芽糖和甘露糖）、有机氮源（麦麸和黄豆芽）有助于香菇菌丝多糖的合成,可作为香菇菌丝液体发酵优势碳源和氮源。（5）不同温度（20 oC、25 oC、28 oC和30 oC）培养条件下,香菇漆酶活性及其基因表达调控特征研究结果表明:25 oC培养条件下香菇菌丝圈及氧化圈最大,而30 oC时的菌丝圈和氧化圈最小。最高漆酶活性最低漆酶活性分别出现在25 oC和30 oC培养条件下。不同温度胁迫下漆酶同工酶基因存在差异性表达,以25 oC为对照组,20 oC培养条件下9个漆酶基因（Llac1-3、Llac5和Llac7-11）表达量上调,28 oC胁迫下除Llac5和Llac7基因以外,其余8个漆酶基因表达量发生上调,而30 oC处理组6个漆酶基因（Llac1-2、Llac4、Llac7-8和Llac10）表达量下调。不同温度胁迫下香菇漆酶活性及其基因出现差异性表达,研究结果对于进一步揭示香菇漆酶的分子调控机制,优化香菇栽培具有重要意义。
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