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目的:应用焦磷酸测序技术定量检测高危型人乳头瘤病毒感染的不同宫颈病变程度的脱落细胞中SLIT2、SOX1和JAM3基因的甲基化水平,比较各基因在各组间甲基化水平的差异,分析其在宫颈癌发生、发展过程中的作用,并探究它们在宫颈癌早期筛查中的临床价值。方法:收取由HCII证实的Hr-HPV感染并经组织病理学诊断的不同宫颈病变程度的脱落细胞,包括正常组45份,宫颈上皮内病变I级(CINI)47份,宫颈上皮内病变II/III级(CINII/III)70份,宫颈癌组85份。采用亚硫酸氢盐修饰结合焦磷酸测序技术检测宫颈脱落细胞中SLIT2、SOX1和JAM3基因的甲基化水平,评价它们对于高级别宫颈癌前病变及宫颈癌的诊断价值。使用SPSS20.0软件对资料进行处理和分析,甲基化的平均水平用平均数±标准差(`X±S)表示,应用单因素方差分析处理数据,组间多重比较采用LSD方法,制作受试者的工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC),并计算曲线下面积(AUC),取得最佳诊断阈值。结果:1.正常宫颈组、CINI组、CINII/III组以及宫颈癌组的脱落细胞标本中SLIT2甲基化水平分别为(5.29±1.29)%、(5.75±2.57)%、(11.65±6.74)%、(25.22±14.63)%,组间差异有统计学意义(F=66.72,P<0.001)。SOX1甲基化水平分别为(5.78±1.17)%、(5.35±1.36)%、(13.17±8.42)%、(32.30±16.38)%,组间差异有统计学意义(F=96.81,P<0.001)。JAM3甲基化水平分别为(3.84±1.84)%、(3.96±1.79)%、(13.78±7.06)%、(25.58±13.09)%,组间差异具有统计学意义(F=92.77,P<0.001)。结果显示各基因的宫颈癌组甲基化水平明显高于其他各组(P<0.001),并且甲基化水平随宫颈病变程度的加重而升高。2.定量检测SLIT2、SOX1和JAM3基因甲基化水平诊断宫颈癌的ROC曲线下面积分别为0.914、0.953和0.925。经ROC曲线下面积计算获得最佳SLIT2基因甲基化水平的界定值为14.08%,敏感性为74.0%,特异性为90.0%。当SOX1界定值为17.25%,敏感性为85.0%,特异性为90.0%。当JAM3基因界定值为16.13%,敏感性为81.0%,特异性为90.0%。同样,诊断CINII/III+的ROC曲线下面积分别为0.940、0.933和0.982。计算获得最佳SLIT2基因甲基化水平的界定值为7.08%,敏感性为86.5%,特异性为88.0%。当SOX1界定值为9.58%,敏感性为83.2%,特异性为100.0%。当JAM3界定值为10.37%,敏感性为85.8%,特异性为100.0%。3.将SLIT2、SOX1及JAM3三基因进行两两联合,发现SLIT2/SOX1诊断宫颈癌的敏感性和特异性分别为82.9%和88.0%,CINII/III+的敏感性和特异性为85.8%和90.8%;SLIT2/JAM3诊断宫颈癌的敏感性和特异性分别为87.1%和86.7%,CINII/III+的敏感性和特异性为90.0%和89.7%;SOX1/JAM3诊断宫颈癌的敏感性和特异性分别为82.4%和91.0%,CINII/III+的敏感性和特异性为90.0%和92.9%。结论:1.在宫颈癌中存在抑癌基因SLIT2、SOX1及JAM3的高甲基化现象,并且甲基化水平随着宫颈病变程度的加重而升高;2.定量检测抑癌基因SLIT2、SOX1及JAM3的甲基化水平对于诊断宫颈癌及高级别癌前病变具有较高的敏感性和特异性;3.联合基因检测对于宫颈癌及高级别癌前病变具有较高的诊断效能;4.焦磷酸测序技术具有操作简单、准确性高、重现性好、高通量且低成本的优点,适用于宫颈癌的早期筛查。