升阳益胃汤治疗脾胃虚弱证型慢性萎缩性胃炎的临床疗效及血清蛋白质组学的研究

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目的研究升阳益胃汤治疗脾胃虚弱证型慢性萎缩性胃炎(CAG)的临床疗效观察。并应用蛋白质芯片技术寻找CAG差异血清蛋白的表达,探讨中药辨证治疗可能的作用机制。方法临床研究:选取CAG中医辨证分型为脾胃虚弱证患者60例,按随机数字表法分为治疗组及对照组,对照组给予西医临床常规治疗,治疗组在对照组基础上加用升阳益胃汤,治疗3个月后,观察两组临床疗效。实验研究:收集CAG脾胃虚弱证患者治疗前血清10例,给予升阳益胃汤治疗后患者血清10例、健康对照组血清10例,用蛋白质芯片技术对三组血清进行分析,寻找及确定差异蛋白点,采用芯片分析软件提取数据,采用AAH-CYT-G6、AAH-CYT-G7、AAH-CYT-G8、AAH-CYT-G9、AAH-CYT-G10的数据分析软件来进行数据分析,Uniprot及David数据库分析差异蛋白。结果1、临床研究结果表明升阳益胃汤可明显提高临床疗效,与单纯西药对照组有显著性差异(P<0.05)。升阳益胃汤治疗组在改善胃镜下征象积分、病理积分方面明显优于西药对照组(P<0.05),并改善中医症状积分,减轻中医症状(P<0.05)。2、CAG脾胃虚弱证型治疗前与健康对照组差异蛋白鉴定结果:分析得出46个差异蛋白点(P<0.05,选取Fold change大于3或小于0.3的信号点,下同),上调的蛋白有33个,下调的蛋白有13个。差异蛋白的生物过程主要涉及到免疫反应、炎症反应、信号转导、趋化作用、凋亡过程的负调节等。3、给予升阳益胃汤治疗后与治疗前相比差异蛋白鉴定结果:分析得出10个差异蛋白点(P<0.05),上调的蛋白有4,下调的蛋白有6个。差异蛋白的生物过程主要涉及细胞趋化性、炎症反应、信号转导、细胞信号、免疫反应等。4、结合治疗前与治疗后差异蛋白分析,肿瘤坏死因子受体超家族成员16(NGFR)、金属蛋白酶组织抑制剂因子4(TIMP-4)、趋化因子20(CCL20)由治疗前与健康对照组比较升高转为正常;胰岛素生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)、趋化因子4(CCL4)、转化生长因子β2(TGFB2)由治疗前与健康对照组比较降低转为正常。结论1、升阳益胃汤可有效降低胃镜下征象积分、病理积分及中医症状积分。有效的改善临床症状,提高临床疗效。2、CAG脾胃虚弱证型治疗前与健康对照组鉴定得出46个差异蛋白点,其中上调最明显的是CXCL16、TIMP-4、NGFR;下调最明显的是TGFβ2、TNFRSF1A、CCL4。这些差异蛋白可能是其发病相关蛋白,对其进行验证对CAG脾胃虚弱证型的诊断有重要的指导作用。3、升阳益胃汤治疗CAG前后的差异蛋白(NGFR、TIMP-4、CCL20、IGFBP-6、CCL4、TGFB2)可能是中药作用治疗的靶点,改善临床症状、阻止病变进一步发展的相关作用位点,有待进一步验证。
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