目的:研究表明氧化苦参碱(OMT)具有多种药理学和生物学特性,而近年来OMT对脏器纤维化的防治作用也越来越受到重视。本研究通过观察2型糖尿病(db/db)小鼠肾组织以及高糖环境下诱导的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)中,Id2、Twist的表达情况及OMT对Id2、Twist、EMT和ECM表达的影响,从体内和体外实验来探讨Id2与Twist在NRK-52E细胞中的作用关系以及OMT对二者及EMT和ECM的影响。初步探讨OMT对高糖环境下诱导的肾小管-间质纤维化的可能保护机制。方法:6周龄的db/db小鼠,分为DM组和OMT组,OMT组予腹腔注射OMT 120mg/kg·d,持续给药8周,并设同月龄同背景db/m小鼠设为对照组(NC组),每组10只。处死前收集db/db小鼠血液和尿液,检测各项生化指标变化情况,通过HE、Masson和PAS染色观察肾组织形态变化,通过Western blot和组织免疫荧光实验来观察各组肾皮质中Id2、Twist、E-cadherin、α-SMA、Fibronectin和Collagen-Ⅳ的表达水平,通过Real-time PCR来观察各组肾皮质中Id2、Twist的RNA表达水平;体外予以30mmol/L的葡萄糖对NRK-52E细胞进行高糖诱导,并分别予以0.1mg/ml OMT、过表达Id2质粒或Id2 si RNA进行干预。通过Western blot、Real-time PCR以及细胞免疫荧光实验来观察各组细胞中Id2、Twist、E-cadherin、α-SMA、Fibronectin和Collagen-Ⅳ表达变化,通过Co-Immunoprecipitation(Co-IP)来验证Id2与Twist蛋白之间的相互作用关系,Luciferase实验来验证Id2的表达,是否会影响Twist下游靶基因E-cadherin启动子的荧光素酶活性。结果:db/db小鼠的空腹血糖、24 h尿蛋白量、总胆固醇、甘油三酯均显著高于NC组,予以OMT治疗8周后,db/db小鼠24 h尿蛋白量、总胆固醇、甘油三酯明显降低,而空腹血糖略有降低但无统计学意义。病理染色结果显示在DM组中可见肾小管上皮细胞发生空泡样变性,肾小管的管腔明显扩张,间质区有炎症细胞浸润和蓝色胶原纤维沉积,经过OMT治疗之后,肾小管病变有所改善,间质区炎症细胞浸润显著减少。体内外实验结果显示高糖刺激后,Id2、E-cadherin的表达明显减少,而Twist、Fibronectin、α-SMA和Collagen-Ⅳ的表达显著增多;予以OMT治疗后,Id2、E-cadherin的表达明显增多,而Twist、α-SMA、Fibronectin和Collagen-Ⅳ的表达显著减少。予过表达Id2质粒干预细胞后,Id2、E-cadherin表达明显增加,α-SMA、Fibronectin和Collagen-Ⅳ的表达明显减少,Twist表达无明显变化;转染Id2 si RNA后,上述指标均反向变化,Twist表达仍无明显改变。通过Co-IP和Luciferase实验发现,Id2与Twist蛋白可相互结合,予以OMT或者转染Id2si RNA干预后,能通过影响Id2的表达,进而影响Twist对下游靶基因E-cadherin启动子的荧光素酶活性。结论:OMT可上调Id2的表达,进一步促进Id2与Twist结合,从而抑制Twist对下游靶基因的调控来发挥抗糖尿病肾小管-间质纤维化作用。