阿维链霉菌菌种选育、所得突变株初步研究及发酵工艺改造

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenghongminghao
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本文以阿维链霉菌(Streptomyces avermitlis)为研究对象,分别以化学、物理诱变剂对出发菌株AVD2-14进行诱变育种。首先采用亚硝酸作为诱变剂进行诱变处理,获得了菌株H20-16、H20-61,它们的Bla组分含量较出发菌株提高了4.1%、7.2%,发酵单位较出发菌株提高了15.3%、2.9%。然后采用物理诱变剂Co<60>γ射线照射并结合甲硫氨酸复合诱变和5-氟尿嘧啶复合诱变对出发菌株阿维链霉菌H20-16进行诱变处理,分别选用3种照射剂量,即:400Gy,700Gy和1000Gy对该出发菌株进行诱变育种。筛选获得发酵单位提高的菌株C039-15和CF(20)-39-61,比出发菌株分别提高了33.3%、16.5%:Bla组分提高的菌株C035-9和CM35-12,比出发菌株分别提高了7.2%、2.3%。 在菌种选育过程中,获得了2株突变株H<,1>20-40和H<,3>20-12。对这2株突变菌株代谢产物的研究表明H<,1>20-40产生的主要代谢产物是寡霉素A,含量可达85%左右,寡霉素A发酵单位可以达到733μg·mL<-1>。突变株H<,3>20-12产生2个主要组分:XL和B2a,XL百分含量为42%,发酵单位为762μg·mL<-1>;B2a百分含量为40.6%,发酵单位为732μg·mL<-1>,H<,2>20-12菌株发酵单位为1989μg·mL<-1>。 微生物的发酵培养基是人们提供给微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物所需要多种营养物质的混合物。培养基组成对菌体生长繁殖、产物的生物合成、产量、产品的分离精制乃至产品的质量都有重要影响。采用单因子实验法及均匀设计实验法分析各种营养成分及其配比对阿维链霉菌Co39-15发酵单位和有效组分Bla含量的影响。试验结果效果显著,获得最佳的种子培养基和发酵培养基的配方,发酵单位及有效组允Bla含量比原来的发酵水平分别提高了29.4%和5.8%。另外通过对种龄、转种量、发酵周期、装瓶量的考察,使得阿维链霉菌的发酵单位及有效组分Bla含量提高,试验效果也较好。
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