含有anti-Waxy基因表达载体的构建及水稻遗传转化

来源 :上海师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:smilepk
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
在大量转基因植物被推向市场的同时,人们对转基因植物可能存在的风险感到担扰。在转基因作物中,不含标记基因和外源启动子将提高转基因作物的食用安全性和对环境的安全性,更易被广大消费者所接受,也有利于对同一个植物品种进行多次转基因操作。本研究在p13W8载体的基础上重新构建了含有反义蜡质基因,且去除了抗性标记基因(潮霉素基因)和35S启动子的安全性表达载体p13AWY-1,这可为日后利用基因工程的共转化法培育优质食味品质安全转基因水稻奠定基础,更有利于消费者食用安全和生态环境的可持续发展。 本研究还利用根癌农杆菌介导的共转化法,将含有pCAMBIA1301双元载体(含有潮霉素抗性基因、gus报告基因)和已成功构建的p13AWY-1双元载体(只含反义蜡质基因不含抗性标记基因和gus报告基因)的根癌农杆菌以1∶9的比例混合导入由粳型光敏核不育系水稻261S成熟胚诱导形成的愈伤组织中,经抗性筛选获得41棵转基因植株。转基因T0代植株经PCR检测,有10棵为共转化植株,共转化率为24.39﹪。Southernblot杂交分析证实,p13AWY-1双元载体T-DNA已整合进入转基因植株基因组中。利用pCAMBIA1301双元载体上的gus报告基因从T1代种子中淘汰具有报告基因及抗性标记基因的转基因后代,这为筛选只含目的基因、无抗性选择标记基因和报告基因的转基因后代奠定基础。 当今世界上正兴起一种新型稻米——软米育种。软米最大特点是:稻米的直链淀粉含量较低,一般小于10﹪,其米质介于粘性与糯性之间,口感极佳。目前已有报道表明,导入蜡质基因(Waxy)的反义片段能够有效降低稻米的直链淀粉含量,但其转基因后代中直链淀粉含量小于10﹪或明显降低的后代都比较少。因此,本研究又在安全性表达载体p13AWY-1的基础上构建含有双份反义蜡质基因的安全性表达载体p13AWY-2,即把双份反义蜡质基因片段构建在一个T-DNA区段上。该表达载体的成功构建可为培育直链淀粉含量明显降低的特种水稻奠定基础。
其他文献
随着技术的发展与进步,克尔效应在高速摄影、光速测量等领域具有广泛的应用前景。然而,天然的克尔媒质需要较高驱动电压、极高纯度要求以及自身化学性质极不稳定等缺陷,其应用范
在当代测试领域当中,信号发生器是一种被普遍应用的通用仪器:在仪器发展历史上,一个具有重要的意义的时间点就是虚拟仪器技术的诞生,不仅代表了测试仪器技术的发展未来前景,
科技的迅速发展使得电磁波高频应用越来越广泛,在计算电磁学领域中电大、超电大目标的电磁散射特性分析伴随着工程需求越来越重要;多层快速多极子方法作为电磁问题分析的快速算法,以其求解复杂度低、计算精度高等优点成为分析电大尺寸散射辐射问题的重要手段和研究热点。本文重点研究了多层快速多极子基于OpenMP的细粒度多线程并行以及基于MPI的粗粒度多进程并行;同时考虑到高阶基函数在保持计算精度和收敛性的前提下仅
期刊
结核病严重威胁人类健康。近年来,由于不规范结核治疗导致的耐药结核分枝杆菌成为结核治疗中的难点。从基因水平阐明结核分枝杆菌耐药性变异的机理,并在此基础上建立敏感、快速
期刊
期刊
期刊
期刊