论文部分内容阅读
孟鲁司特钠是美国默克公司开发的一种白三烯受体拮抗剂,主要用于哮喘的治疗与预防,1998年与2002年美国食品药品管理局(FDA)先后批准其片剂(l0mg、5mg规格)与颗粒剂(4mg规格)上市,商品名称均为顺尔宁。片剂适用于15岁(10mg规格)与6岁(5mg规格)以上人群,颗粒剂适用于1岁以上人群,目前国内颗粒剂仅有原研厂家品种上市,进行颗粒剂的仿制具有良好的社会效益与经济效益。口服固体制剂仿制的关键在于一致性评价及有关物质质量控制。用于体外一致性评价的多pH条件溶出曲线方法要求具有良好的区分力,目前孟鲁司特钠颗粒溶出曲线方法多数不能满足要求。有关物质方面,2018年以后孟鲁司特钠颗粒被美国药典(USP)与英国药典(BP)收载,但所有文献均未说明原研颗粒各有关物质(含未知成分)的种类与来源途径,且USP降解有关物质孟鲁司特酮(Montelukast ketone)未被BP收载,其原因不明确。本文以原研孟鲁司特钠颗粒为研究对象,依据国家普通口服固体制剂溶出曲线测定与比较指导原则,采用全自动溶出仪技术开展溶出曲线筛选优化,建立了具有良好区分力的多pH溶出曲线方法;基于核壳型色谱柱技术建立了多pH溶出曲线样品HPLC快速测定方法;采用液相质谱联用(HPLC-MS)与串联质谱(MS/MS)技术对原研孟鲁司特钠颗粒(顺尔宁)有关物质种类与来源途径进行了分析,对制剂工艺过程中产生的未知有关物质进行了结构推导。本文所做工作可为孟鲁司特钠颗粒的仿制提供参考和依据。本论文的研究内容主要包括以下几个方面:1.高通量HPLC法用于溶出样品的快速定量以孟鲁司特二环已胺为外标,建立了基于核壳型苯基键合硅胶填料色谱柱技术的溶出曲线样品HPLC快速定量方法,并进行了方法学验证。该方法采用的色谱柱具有柱压低,出峰快等特点,能够在HPLC上实现样品的快速高通量测定。该方法对不同pH溶出样品均具有良好的定量能力,尤其对于稳定性较差的酸性(pH1.2)介质溶出样品,其快速测定能力能够确保测定结果的准确性。2.孟鲁司特钠颗粒溶出曲线方法的建立依据国内普通口服固体制剂溶出曲线测定与比较指导原则和日本PMDA文献,建立了以 pH1.2-0.4%十二烷基硫酸钠(SDS)、pH4.5-0.5%SDS、pH6.8-0.1%吐温80为溶出介质的三种溶出曲线条件,用以进行仿制孟鲁司特钠颗粒的一致性评价工作;采用改变关键辅料羟丙基纤维素(HPC)加入方式、用量与流化床制粒设备参数制得样品对溶出曲线方法的区分力进行考察,结果表明所建方法具有良好的区分力,能够用于孟鲁司特钠颗粒仿制药一致性评价工作,提高仿制药生物等效(BE)实验通过率。同时根据实验结果就如何建立口服固体制剂溶出曲线方法进行了探讨,具有良好的参考作用。3.孟鲁司特钠颗粒有关物质的定性分析采用两种液相色谱条件,在原研孟鲁司特钠颗粒中共分离出了 8种有关物质。运用HPLC-MS与MS/MS技术并依据有关文献对8种有关物质进行了鉴定,其中的7种为已知成分,对未知成分的结构进行了推导。初步明确了原研孟鲁司特钠颗粒的有关物质的物质基础。4.孟鲁司特钠颗粒有关物质的来源途径研究通过孟鲁司特钠合成路线分析、强制降解、制剂工艺过程检测等多角度对原研颗粒有关物质来源途径进行了研究,研究结果显示有关物质迈克尔加成物(2种,空间异构体)与甲基苯乙烯化合物来源于原料的合成工艺;亚砜化合物(2种,空间异构体)来源于氧化降解途径,顺势异构体来源于光照降解途径;未知成分来源于HPC制粒后干燥工序;原研颗粒中孟鲁司特酮(USP降解杂质)含量较低(0.02%),其降解生成的速度可能较慢。本章研究初步明确了原研孟鲁司特钠颗粒中各有关物质的来源途径与制剂的稳定性情况,对仿制制剂工艺的设计具有重要的参考作用。