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本研究以从某鸭场分离的11株鸭疫里默氏菌为基础，通过一系列试验在优势血清型菌株中选择致病力强且免疫原性好的作为研究对象，通过对比试验确定一种增菌效果较好的培养基，再利用单因素试验和正交试验进行鸭疫里默氏菌液体培养基配方的研究，探讨何种培养基成份最适宜鸭疫里默氏菌的生长，并把优化结果应用到高密度发酵培养中，进行发酵工艺的优化，为下一步研制优质、高效的疫苗打好基础。其主要研究内容如下。1.鸭疫里默氏菌分离鉴定及制苗菌株的筛选北京某鸭场送检的鸭传染性浆膜炎疑似病例开展了鸭疫里默氏菌的分离鉴定工作，并进一步进行了其致病性试验和免疫原性分析。结果显示，成功分离到11株细菌,并可以分为三个血清型，以Ⅰ型和Ⅱ型感染为主；攻毒试验表明11株分离株对14日龄樱桃谷雏鸭致病性差异较大，从4/10到10/10不等；免疫原性试验结果表明分离株JX-2、JX-6和JX-10制成的疫苗攻毒保护率均可以达到80%以上。故应考虑使用含此3种血清型的菌株制成多价苗对该养殖场进行预防接种。2.鸭疫里默氏菌液体增菌培养基的筛选及优化本研究对改良马丁肉汤、改良酵母肉汤、 P-L肉汤和胰胨大豆胨肉汤四种培养基的增菌效果进行了对比。结果表明，改良酵母肉汤的增菌效果在4种培养基中是最好的，测定细菌的生长曲线，JX-2株在改良酵母肉汤中培养24h时达生长最高峰，菌液活菌数可达166×108CFU/ml。再以改良酵母肉汤为基础培养基通过单因素试验和正交试验进行鸭疫里默氏菌液体培养基配方的优化，单因素试验结果表明水解乳蛋白、酵母浸液、大豆蛋白胨、猪胃消化液、裂解血、马血清等成分对菌液浓度的增长起到很大的作用；正交试验结果表明当选取20%酵母浸液5%；猪胃消化液10%；大豆蛋白胨5%；马血清5%时获得的菌液浓度最高。3.鸭疫里默氏菌高密度发酵培养工艺优化及验证本研究应用小型发酵罐，对影响鸭疫里默氏菌发酵的因子：通气（L/S.L）、转速（转/分）、培养基pH值等这3个因素进行3因素3水平正交实验，来进行鸭疫里默氏菌高密度发酵培养工艺优化，高密度发酵条件优化结果显示：通气0.1L/S.L；转速150转/分；培养基pH值7.4时所获得的活菌数及菌液浓度最高。利用优化配方和优化发酵工艺，在GMP生产车间大规模试生产3批次鸭疫里默氏菌半成品抗原，活菌数比优化之前提高约30%，因此本研究为大批量高密度发酵生产鸭疫里默氏菌抗原提供了试验依据。