白癜风患者血清抗黑素细胞抗体及其相关抗原的分析研究

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检测白癜风患者血清抗黑素细胞胞质和胞膜蛋白抗体,并鉴定高识别率的胞膜抗原;检测白癜风患者血清抗酪氨酸酶相关蛋白1抗体与热休克蛋白70表达水平,分析二者的相关性,探讨自身免疫机制在白癜风发病中的作用以及HBV感染者并发白癜风的原因。体外培养高纯度正常人黑色素细胞,间接免疫荧光法检测白癜风患者血清抗黑素细胞抗体并对相关抗原定位,裂解黑素细胞并抽提黑素细胞胞质和胞膜蛋白,免疫印迹法分别检测50例白癜风患者血清(4例HbsAg阳性)和20例正常对照血清中的抗黑素细胞胞质蛋白和胞膜蛋白抗体,并用蛋白质谱分析技术鉴定高识别率的胞膜抗原;ELISA法检测70例白癜风患者血清(10例HbsAg阳性)和26例正常对照血清中的抗酪氨酸酶相关蛋白1抗体和热休克蛋白70的表达水平,并对二者水平进行相关性分析。间接免疫荧光法检测显示:抗黑素细胞阳性荧光位于黑素细胞胞质和胞膜上,说明白癜风相关黑素细胞抗原位于黑素细胞胞质及胞膜上。免疫印迹法检测显示:50例白癜风患者血清有40例与黑素细胞膜抗原结合,阳性率为80%。相应膜抗原分子量大约为86×103,75×103,60×103,52×103和44×103,各条带阳性率分别为36%,58%,22%,2%和2%;50例白癜风患者血清有15例与黑素细胞胞质抗原结合,阳性率为30%。其分子量大约为110×103,90×103,75×103,50×103和40×103,各条带的阳性率分别为12%,4%,12%,10%和2%。20例正常对照血清抗黑素细胞胞膜抗原和胞质抗原的阳性率分别为15%和5%,白癜风组均明显高于对照组。蛋白质谱鉴定结果显示:分子量为86×103和75×103的膜抗原为lamin A/C,分子量为60×103的膜抗原为vimentin X1。在合并乙型肝炎的白癜风患者血清中存在高水平的抗酪氨酸酶相关蛋白1抗体与热休克蛋白70,并且二者浓度呈显著正相关性(r=0.927,P<0.01)。综上所述,本实验发现了一个新的白癜风相关黑素细胞膜抗原,这对白癜风自身免疫机制的研究有重要意义。通过检测合并HBV感染的白癜风患者血清中的抗酪氨酸酶相关蛋白1抗体和热休克蛋白70表达水平,探讨了HBV感染与白癜风发病的关系及自身免疫机制在白癜风发病中的作用。
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