中华补血草总黄酮的提取分离及抗氧化活性研究

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中华补血草属兰雪科多年生草本植物,在我国有悠久历史,具有耐盐、耐瘠、耐旱、耐湿等特点,因此多生长滨海滩涂上,广泛分布于我国东北、华东、华北等地区,尤以江苏、浙江、福建省沿海滩涂分布甚广。中华补血草可用于祛湿,清热,止血等,效果良好。前人对中华补血草的研究多集中在其耐盐特性方面,关于其化学成分的报道并不多见。本研究以中华补血草为原料,分别采用微波辅助、超声波辅助提取法及加热回流提取法提取其中的黄酮类化合物。微波辅助提取法以微波提取温度、微波提取时间、料液比为影响因子;超声波辅助提取法以超声提取时间、乙醇浓度及超声提取时间为影响因子;加热回流提取法以提取时间、回流提取温度及料液比为影响因子,应用Box-Behnken中心组合设计建立数学模型,以总黄酮提取率为响应值,进行响应面分析。结果显示,微波辅助提取的最佳工艺为提取时间28.62min,提取温度65.32℃,液固比47.63:1,此条件下,总黄酮提取率为1.53783%;超声波辅助提取中华补血草总黄酮最佳工艺为乙醇浓度72.89%,超声时间30.59min,料液比1∶51.38,总黄酮提取率为16.1662mg/g;加热回流提取的最佳工艺回流提取71.89min,回流温度72.08℃,料液比54.41,总黄酮提取率为11.9975mg/g。有关中华补血草中黄酮类化学成分的研究报道较少,为进一步揭示中华补血草中的黄酮类抗氧化活性成分,本实验对中华补血草的黄酮类抗氧化活性成分进行了研究。运用硅胶柱层析法对中华补血草乙酸乙酯相进行初步分离纯化,其后,采用分光光度法及DPPH、羟自由基清除法对其组分进行黄酮含量及抗氧化活性研究,筛选出黄酮含量及抗氧化活性最高的组分,继续采用硅胶柱层析法进行分离,最后利用Sephadex LH-20葡聚糖凝胶进行纯化及HPLC进行分析,运用核磁、紫外、质谱等波普技术对分离纯化得到的单体化合物进行检测,确定其化学结构。
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