二氧化碳对肝癌细胞体外侵袭作用的研究

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lifengjun001
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目的:通过模拟腹腔镜手术建立人工体外气腹环境,利用不同气腹压力下CO2对肝癌细胞体外侵袭性进行研究,探讨肝癌腹腔镜切除的肿瘤安全性以及低压气腹、免气腹肝癌切除的临床应用前景。方法:建立体外CO2气腹模拟环境,选用人肝癌细胞株SMMC-7721,分别在6、9、12、15mmHg不同压强CO2气腹环境及常规培养环境中作用1小时;用Transwell侵袭小室及MTT比色法来检测模拟不同压力CO2气腹对体外培养的肝癌SMMC-7721细胞侵袭、迁移和黏附能力的影响;并用免疫细胞化学方法检测各组肝癌SMMC-7721细胞在不同压力CO2气腹环境作用后,不同时相点基质金属蛋白酶MMP-9和血管内皮生长因子VEGF蛋白表达变化的情况,分析不同压力CO2气腹环境下对肝癌细胞体外侵袭作用的影响。结果:各实验组均随CO2压力的增强其侵袭、迁移及黏附能力逐步提高,9mmHg组与对照组相比黏附能力显著提高(P<0.01),12mmHg组与对照组相比侵袭及黏附能力显著提高(分别为P<0.05和P<0.01),15mmHg组与对照组相比其侵袭、迁移及黏附能力均得到显著增强(分别为P=0.008、P=0.015及P<0.01);细胞黏附能力在培养48h后达高峰,随后下降在72h时低于处理后水平(12mmHg组及15mmHg组均P<0.05);免疫细胞化学其基质金属蛋白酶MMP-9和血管内皮生长因子VEGF蛋白的表达,随CO2作用压力升高而逐渐增多,9mmHg组、12mmHg组和15mmHg组中与对照组相比MMP-9蛋白表达显著升高(P<0.01),12mmHg组和15mmHg组与对照组相比VEGF蛋白表达显著升高(P<0.01);MMP-9及VEGF蛋白表达在CO2气腹作用后逐渐升高,24h达高峰,随后下降。结论:较高压力的CO2气腹环境对肝癌SMMC-7721细胞侵袭有显著促进作用,可能与CO2气腹显著促进肝癌SMMC-7721细胞MMP-9及VEGF表达有关;腹腔镜肝癌切除术可尽量使用低压气腹、免气腹,以降低CO2气腹压力对肿瘤细胞侵袭能力的影响。
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