金银花绿原酸的提取纯化研究

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绿原酸(chlorogenic acid)是一种苯丙素类物质,是植物利用磷酸戊糖途径(HMS)中产生的中间产物经过有氧呼吸过程合成的,主要存在于忍冬科忍冬属(Lonicera)、菊科篙属(Artemisia)及杜仲科杜仲属植物中。大量研究表明绿原酸具有广泛的药理活性和生物学活性,对消化系统、血液系统和生殖系统等病症防止均有一定的效果。目前,对绿原酸生物活性的研究正逐渐拓展至食品、保健、医药和日用化工等多个领域。本文对金银花中绿原酸的提取工艺进行了研究,采用黄山祁门产金银花为原料,在传统提取方法上进行改进,并通过对提取剂种类、浓度、pH值以及提取时间、提取温度、料液比等主要影响因素进行相关试验,在单因素试验的基础上进行了优化工艺的正交试验,得到最佳提取条件为:溶剂pH值为4,料液比为1:20,温度为60℃,乙醇溶液浓度为60%,提取时间为1.5小时。利用HPLC法进行测定,得到绿原酸的平均提取率为3.67%,绿原酸含量4.63%。采用D101大孔吸附树脂柱层析对绿原酸粗粉进行纯化,通过单因素及正交试验对洗脱溶液浓度、洗脱溶液用量、pH值以及洗脱速度等主要因素进行考察,确定了最佳洗脱条件为洗脱液为20%的乙醇,洗脱液体积为5BV,洗脱液pH值为8,洗脱液流速为4BV/h。在上述条件下得到的绿原酸产品纯度为58.3%,收率为76.9%。在D101大孔树脂纯化的基础上,本实验又利用Sephadex G-15树脂对绿原酸产品进一步处理,通过试验得到最佳洗脱条件是洗脱液为50%的丙酮水溶液,洗脱液pH值为4,洗脱速度为1ml/min。得到绿原酸产品纯度为82.52%,得率为37.6%。后经乙酸乙酯萃取,得到绿原酸产品纯度高达86.16%。通过实验确立了一套从金银花中提取纯化绿原酸的工艺参数,对生产实践具有一定的指导意义。
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