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作为世界常见的恶性肿瘤,胃癌(GC,Gastric cancer)是一种来源于胃黏膜上皮组织的恶性肿瘤,在临床上拥有较高的发病率。据权威报告显示,胃癌的发病率在所有恶性肿瘤的发病率中排名第4,死亡率排在第3。在胃癌中男性明显高于女性,并且年龄越大发病率越高。而在胃癌中,胃腺癌是最常见的恶性肿瘤。大多数胃腺癌患者没有明显的早期症状,就诊时更多的患者出现了严重的癌细胞浸润和转移,对人类的身心健康造成了极其严重的威胁,是我国癌症预防和治疗的重点。肿瘤细胞的异常增殖和细胞凋亡的失调,是导致恶性肿瘤发生的重要因素。机体内的肿瘤细胞由于受到各方面因素的影响,导致其无法正常凋亡,能够进一步导致肿瘤的发生。因此,探究调节胃腺癌细胞凋亡机制的核心分子及其作用机制,对于胃腺癌的早期筛查及诊疗至关重要。相关研究表明肿瘤细胞的凋亡与多种靶基因的调控作用有关。其中,细胞凋亡的死亡受体途径和线粒体途径在当前所有的研究中,是研究较为热门的主要发生机制。Fas相关死亡结构域蛋白(Fas associated protein with death domain,FADD)是存在于胞浆中的一种能与Fas分子死亡结构域(death domain,DD)产生相互作用的全新的胞浆连接蛋白。FADD中的DD与Fas分子中的DD在相互作用的过程中激活肿瘤细胞中的Fas-Fas L信号通路。Fas-Fas L信号传导途径,在细胞凋亡中属于死亡受体途径。我国对恶性肿瘤中的FADD在胃腺癌组织中表达情况鲜有报道,仅限于蛋白水平。Caspase-7(cysteine protease-7protein,半胱氨酸蛋白酶-7蛋白)被起始因子Caspase-1、Caspase-8激活后,执行凋亡功能,位于凋亡级联反应的下游,是细胞凋亡的关键效应因子。但是,当前我国对Caspase-7在胃腺癌组织中表达的情况研究较少,也仅限于蛋白水平。对于胃腺癌中FADD、Caspase-7两者表达的相关性,当前并未出现有关该方面的研究报道。综上,本次设计主要利用免疫组化SP法、blotting Western技术、PCR-q RT技术分别检测FADD蛋白及m RNA、Caspase-7蛋白及m RNA在胃腺癌组织和癌旁正常胃黏膜组织中的表达情况,同时对两者是否存在相关性进行综合分析,并对其在胃腺癌组织中与临床病理特征之间的关系进行研究。探讨FADD及Caspase-7对胃腺癌的产生、发展具有怎样的影响,从而为胃腺癌患者的诊断、治疗提供新的理论依据。目的:本研究旨在探究FADD蛋白及m RNA和Caspase-7蛋白及m RNA在胃腺癌组织及癌旁正常胃黏膜组织中的的表达情况,分析二者在胃腺癌组织中表达是否具有相互关系,分析胃腺癌临床病理特征与两者之间的关系。方法:1通过免疫组织化学SP染色法及Western blotting技术检测60例临床胃腺癌组织样本和50例癌旁正常胃黏膜组织样本中FADD蛋白及Caspase-7蛋白的表达水平,探究胃腺癌组织中两者表达是否具有相互关系,并分析其与胃腺癌临床病理特征之间存在的关系。2采用q RT-PCR技术,检测60例临床胃腺癌组织样本和50例癌旁正常胃黏膜组织样本中FADDm RNA及Caspase-7m RNA的表达水平,探究胃腺癌组织中两者表达是否具有相互关系,并分析其与胃腺癌临床病理特征之间存在的关系。结果:1通过免疫组化SP法,发现胃腺癌组织内Caspase-7蛋白、FADD蛋白的阳性表达率分别为46.7%、38.3%,在癌旁正常胃黏膜组织中,两者阳性表达率分别为68.0%、60.0%,二者在胃腺癌中的阳性表达率与癌旁正常胃黏膜组织相比下调,统计学分析具有差异性(P<0.05)。1.1胃腺癌组织样本中FADD蛋白及Caspase-7蛋白表达水平与患者年龄的大小、性别的差异不存在关系,统计学分析不具有差异性(P>0.05)。而分析数据发现,淋巴结转移、分化程度、临床TNM分期、浸润深度均与两者的表达水平有关系,统计学分析具有差异性(P<0.05)。1.2胃腺癌组织样本中FADD蛋白及Caspase-7蛋白的表达之间具有相互关系,统计学分析具有差异性(P<0.05)。2通过blotting Western结果检测分析,胃腺癌组织样本中FADD蛋白和Caspase-7的蛋白表达水平相比,在胃腺癌组织中表达低,在癌旁正常胃黏膜组织中表达高,统计学分析具有差异性(P<0.05)。2.1胃腺癌组织样本中FADD蛋白及Caspase-7表达水平与患者年龄的大小、性别的差异并无关系,统计学分析不具有差异性(P>0.05),但分析数据发现,淋巴结转移、分化程度、临床TNM分期、浸润深度均与两者表达水平有关系,统计学分析具有差异性(P<0.05)。2.2胃腺癌组织样本中,FADD蛋白及Caspase-7蛋白的表达有相关性,统计学分析具有差异性(P<0.05)。3 q RT-PCR检测结果显示:胃腺癌组织样本中FADD的m RNA及Caspase-7的m RNA表达水平均显著低于癌旁正常胃黏膜组织,统计学分析具有差异性(P<0.05)。3.1胃腺癌组织中FADD及Caspase-7二者m RNA表达水平与患者年龄的大小、性别的差异并无关系,统计学分析不具有差异性(P>05.0),但分析数据发现,淋巴结转移、分化程度、临床TNM分期、浸润深度均与两者表达水平有关系,统计学分析具有差异性(P<0.05)。3.2胃腺癌患者组织样本中FADD的m RNA表达水平与Caspase-7的m RNA表达具有相关性,统计学分析具有差异性(P<0.05)。结论:1 FADD蛋白及m RNA在胃腺癌中低表达,在癌旁正常胃黏膜组织中高表达,且与胃腺癌的淋巴结转移、TNM临床分期、分化程度、浸润深度相关,因此可得到,FADD参与了胃腺癌的发生、发展过程。2 Caspase-7蛋白及m RNA在胃腺癌中低表达,在癌旁正常的胃黏膜上皮组织中高表达,且与胃腺癌的淋巴结转移、TNM临床分期、分化程度、浸润深度有关系,因此可得到,Caspase-7参与了胃腺癌发生、发展过程。3在蛋白水平和基因水平上,均提示胃腺癌组织中FADD和Caspase-7表达之间具有一定的相关性,且可能存在一定的正协同作用。