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本文采用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术在种及菌株水平上对双歧杆菌进行分类鉴定，并建立了相应的快速，可靠的双歧杆菌DNA提取方法。筛选到了一条在种和菌株水平上具有良好鉴别能力的RAPD引物S256，并用该引物对一株耐保藏双歧杆菌菌株进行了鉴定。此外还探讨了诸多因素对RAPD扩增结果的影响。主要结果如下： 1．建立了溶菌酶-SDS-醋酸钾法，溶菌酶-煮沸法两种快速，简便，安全的DNA提取方法。用这两种方法提取出的DNA作为RAPD扩增的模板，具有较好的扩增效果和重复性。 2．通过正交试验和完全交叉试验，确定了RAPD最优化扩增反应体系为：模板DNA浓度为50ng；Mg2+浓度为3mM；引物用量为10pmol；dNTP为200μM；Taq酶用量为1U以及扩增条件为：94℃变性30秒；36℃复性60秒；72℃延伸120秒；最后72℃延伸420秒。 3．通过对9株标准双歧杆菌菌株DNA的扩增，筛选出一个在种和菌株水平上都有良好分辨力的随机引物S256，其序列为CTGCGCTGGA。 4．采用属特异性常规PCR，生化试验，RAPD三种方法在属，种，菌株三个分类水平上鉴定出本试验室保存的一株耐保藏双歧杆菌为JCM1192短双歧杆菌。 5．对RAPD扩增结果有影响的诸因素进行了研究。实验表明，使用不同的PCR仪对扩增结果影响较大；不同厂家生产的Taq酶以及不同方法提取所得DNA对扩增结果有一定的影响；虽然不同方法提取所得DNA的RAPD图谱不完全相同，但同一种DNA自身的扩增重复性较好；一定范围内（30℃-40℃）的不同复性温度对扩增图谱影响不大；在其他条件不变的情况下，批内批间重复、由不同操作人员操作以及使用不同体积的PCR管对扩增结果无明显影响。