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前言 干细胞是指那些具有自我更新能力,在一定的条件下又能产生各种高度分化的子代细胞的增殖性细胞。干细胞大致可分为胚胎干细胞和成体干细胞,目前已发现的成体干细胞有造血干细胞、骨髓间充质干细胞、神经干细胞、肌肉干细胞、角膜干细胞、胰腺干细胞、皮肤干细胞、肝脏干细胞等,临床已开始应用干细胞治疗血液、心脏、肝脏、神经等系统疾病。由于气管干细胞缺乏特异性的表面标志物,以及没有合适的研究气管干细胞的在体模型,其体内的增殖分化过程及调控机制一直没有明确。 本研究通过应用氟尿嘧啶（5-FU）建立大鼠体内气管损伤修复模型,5-FU属抗嘧啶类代谢药,通过抑制胸腺嘧啶核苷酸合成酶而抑制DNA的合成,可造成细胞周期内细胞的变性坏死,主要作用于S期,对增殖细胞的各期均有作用,但对G0期细胞不敏感,故有利于研究处于G0期的干细胞。Hoechst33342是属于Bisbenzimid类的活细胞荧光色素,细胞通透性高,能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,受紫外光激发后能发出波长405nm和675nm两种荧光,在荧光显微镜下可看到明亮的蓝色荧光,因此能观察到Hoechst33342阳性细胞团。使用流式细胞仪进行分析时,两个波长均弱着色或完全不着色的细胞团中有很高的干细胞活性,分离出的细胞称为侧群（SP）细胞。本研究采用光镜、免疫组化、荧光染色等方法,观察气管上皮修复过程并对干细胞加以定位研究;ABC转运蛋白家族成员ABCG2/Bcrp1基因在不同来源SP干细胞均呈高表达,从小鼠骨骼肌和恒河猴骨髓中分离的SP细胞均有ABCG2/Bcrp1表达,而非SP细胞则不表达,故ABCG2/Bcrp1可作为确定SP干细胞的表型标记,并与SP细胞群所呈现的Hoechst33342弱着色或不着色相关,本研究采用免疫荧光及RTPCR方法对气管干细胞中ABCG2在蛋白及mRNA水平的表达加以研究。