目的：1.证实是否可以通过增加hBMSCs移植剂量及频次来治疗1型糖尿病模型小鼠(NOD/Ltj),以增加疗效、延长疗效的维持时间；2.进一步明确hBMSCs能否于NOD/Ltj小鼠体内跨胚层转分化为胰岛素分泌细胞；3.探讨不同剂量、频次hBMSCs移植治疗NOD/Ltj免疫调节效应的差异；4.观察hBMSCs移植后的安全性。方法：1型糖尿病模型小鼠(NOD/Ltj)建模成功后随机分为低剂量组(0.5×106)、高剂量组(1×106)、低剂量重复输注组(0.5×106,一周输注两次)及对照组。hBMSCs由尾静脉输注入小鼠体内,每周监测血糖、体重；于不同周龄(移植组分别于2W、4W、6W时,对照组分别于0W、2W、4W、6W时)处死,留取血清及组织标本,ELISA检测小鼠外周血清鼠胰岛素、人胰岛素以及炎症因子的含量,流式细胞仪检测小鼠脾脏内调节性T细胞(CD4+CD25+FoxP3+)比例、淋巴细胞亚群分群(CD4+/CD8+T淋巴细胞比例)；HE染色观察小鼠胰岛及胰岛内细胞形态；免疫组化方法检测小鼠胰岛素的表达情况。结果：1.疗效的差异：①与对照组比较,高剂量组小鼠在移植后1W、2W、3W、4W、 5W时血糖降低(p<0.05),低剂量重复输注组在1W、2W、3W、4W、5W, 6W时降低(p<0.05),而低剂量组仅在1W,2W,3W、4W时降低(p<0.05)；高剂量及低剂量重复输注组在移植后2W、4W时外周血清鼠胰岛素含量升高(p<0.05),而低剂量组仅在2W时升高(p<0.05)；②与低剂量组比较,仅低剂量重复输注组在6W时血糖降低(p<0.05)2.人胰岛素的表达：本实验中不同剂量、频次移植组小鼠在不同周龄外周血清中未测出人胰岛素。3.免疫调节效应的差异：①与对照组比较：高剂量组与低剂量重复输注组小鼠Treg细胞比例在2W、4W、6W时均升高(p<0.05),而低剂量组仅在4W时升高(p<0.05)；高剂量组、低剂量重复输注组CD8+T淋巴细胞比例在4W、6W时降低(p<0.05)；低剂量组小鼠外周血清IFN-y浓度在4W时降低(p<0.05),高剂量组、低剂量重复输注组在2W、4W、6W时均降低(均(p<0.05)；三组移植组小鼠外周血清TNF-a浓度在2W、4W、6W时均降低(均(p<0.05)；低剂量组小鼠外周血清IL-10浓度在2W时升高(p(p<0.05),高剂量组和低剂量重复输注组在2W、4W、6W时均升高(均p<0.05)；三组移植组小鼠外周血清TGF-β浓度在4W、6W时均升高(均p<0.05)；高剂量组胰岛炎评分在2W、6W时降低,低剂量重复输注组在6W时降低；高剂量和低剂量重复输注组小鼠胰岛免疫组化胰岛素累积光密度(IOD)表达值在2W、4W、6W时升高(p<0.05)；低剂量组仅在6W时增多(p<0.05)。②与低剂量组比较：高剂量组Treg细胞比例在2W、6W时升高(p<0.05),低剂量重复输注组在6W时升高(p<0.05)；高剂量组在2W、6W时CD8+T淋巴细胞比例显著降低,低剂量重复输注组在2W、4W时降低(p<0.05)；高剂量组和低剂量重复输注组小鼠外周血清IFN-γ浓度在6W时均降低(均p<0.05)；高剂量组和低剂量重复输注组小鼠外周血清IL-10浓度在4W、6W时均升高(均p<0.05)；低剂量重复输注组胰岛炎评分在6W时降低(p<0.05)；高剂量组胰腺免疫组化可见胰岛处胰岛素阳性区域IOD值在2W、4W、6W时升高(p<0.05),低剂量重复输注组在2W、4W时升高(p<0.05)。③与高剂量组比较：低剂量重复输注组Treg细胞比例在4W时升高(p<0.05),CD8+T淋巴细胞比例在4W时降低(p<0.05),小鼠外周血清IFN-γ、TNF-α、IL-10浓度在4W时均升高(均p<0.05)；外周血清TGF-β浓度在6W时升高(p<10.05)4.移植的安全性：本研究过程中各移植组小鼠体内均未发现骨样或软骨样瘤,仅于低剂量重复输注组一只小鼠下颌处皮下发现一炎性结节。结论：1.不同剂量、频次hBMSC移植后,可不同程度地降低NOD/Ltj小鼠血糖,并使血清中胰岛素水平不同程度升高,其中高剂量和低剂量重复输注组的疗效维持时间更长久；2.不同剂量、频次hBMSC在NOD/Ltj小鼠体内均未转分化成为胰岛素分泌细胞；3. hBMSC对循环T淋巴细胞的免疫调节效应(Treg比例增高、致病性CD8+T/CD4+T细胞减少、促炎性细胞因子浓度降低、抗炎性细胞因子浓度增加)以及NOD/Ltj小鼠体内受损胰岛的修复程度,与hBMSC回输量及频率均呈现一定的正相关性。4.尽管本研究中未在小鼠体内发现瘤样改变,但不排除MSCs具有潜在的恶变可能,其安全性仍有待进一步验证。