小麦黄花叶病(Wheat yellow mosaic,WYM)是以禾谷多黏菌(Polymyxa graminis)为传播介体的小麦黄花叶病毒(Wheat yellow mosaic bymovirus,WYMV)引起的一种土传病毒病害。该病害逐渐扩展到全国多个冬小麦产区,日益成为影响我国小麦生产的严重病害之一。发生该病害的田块,造成的产量损失可达50%。在本实验室前人的研究中,利用高抗WYM品种“仪宁小麦”和感病品种“镇9523”为亲本配置的RIL群体,在2D染色体长臂上定位到了 一个抗WYMV主效QTL QYm.nau-2D,贡献率高达85.73%。利用RIL群体中的一个仅携带QYm.nau-2D的抗病家系“RIL11-14”和“镇9523”构建的F2及次级分离群体,将QYm.nau-2D定位于标记Xcfd267和2EST811之间。本研究在此基础上,利用“仪宁小麦”和感病材料普通小麦中国春-粗山羊草2D代换系“20111-78”配置F2及其次级分离群体,通过标记开发和加密,对“仪宁小麦”抗病QTL QYm.nau-2D进行精细定位,为抗病分子辅助选择育种(MAS)奠定基础。主要研究结果如下:(1)对“20111-78”和“仪宁小麦”构建的F2群体进行遗传分析,抗、感单株表型分离比为3:1(x2=0.56,x20.05=3.84),表明该群体中WYMV抗性受一个显性单基因控制。对“仪宁小麦”抗黄花叶病QTL 进行初定位,将QYm.nau-2D定位于标记Xvmc41和标记Xgwm349之间,分别距两侧标记0.9cM和5.9cM。(2)利用已公布的小麦品种中国春参考序列信息与小麦EST数据比对,跨内含子开发了 131对引物,7对引物在双亲本和抗池和感池间可扩增出多态;同时利用小麦供体祖先种粗山羊草的2D序列,开发了 94对引物,11对引物在在双亲本和抗池和感池间可扩增出多态。(3)利用新开发的多态标记对目标区域加密。选用标记2ESTJ8、Wxe1339和标记2D-SSR-10为两翼标记,在F2群体及其衍生的F2:3,F2:4群体中的感病单株(共900株)中筛选交换单株,共获得77株交换单株,进一步将QYm.nau-2D定位于标记2ESTB8和标记2ESTK2、2D-SSR-12之间,标记Xwmc41附近,覆盖大约28Mb物理区间。(4)选用标记Xwmc41、Wxe1339、Xwmc181为诊断标记,对195个已知抗感WYMV材料或品种(系)进行标记分析。发现标记Xwmc41、Wxe1339和Xwmc181均能作为QYm.nau-2D的诊断标记,用于分子标记辅助选择育种。