【摘 要】
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目的:虽然以R-CHOP为代表的治疗方案在弥漫大B细胞淋巴瘤的治疗过程中取得了良好的疗效,但在其一些亚型,如“双表达”淋巴瘤中的疗效仍不太理想,为此我们旨在探索中西医结合的治疗方案以提高临床疗效。观察在“双表达”淋巴瘤SUDHL-6细胞中加入益气除痰方后的增殖抑制作用,线粒体膜电位以及蛋白表达水平的变化,并在此基础上观察其相关基因表达水平的变化,探索其诱导凋亡的可能机制。方法:将“双表达”淋巴瘤细
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目的:虽然以R-CHOP为代表的治疗方案在弥漫大B细胞淋巴瘤的治疗过程中取得了良好的疗效,但在其一些亚型,如“双表达”淋巴瘤中的疗效仍不太理想,为此我们旨在探索中西医结合的治疗方案以提高临床疗效。观察在“双表达”淋巴瘤SUDHL-6细胞中加入益气除痰方后的增殖抑制作用,线粒体膜电位以及蛋白表达水平的变化,并在此基础上观察其相关基因表达水平的变化,探索其诱导凋亡的可能机制。方法:将“双表达”淋巴瘤细胞株SUDHL-6细胞复苏后进行培养传代后,采用CCK-8法观察并对比Myc抑制剂、Bcl2抑制剂及益气除痰方对肿瘤细胞生长的抑制作用。运用流式检测线粒体膜电位的变化,验证益气除痰方是否能够诱导“双表达”淋巴瘤细胞凋亡,并通过细胞转染调控Myc及Bcl2的表达验证相关基因对线粒体凋亡的作用。Western blot检测加入益气除痰方后,“双表达”淋巴瘤细胞凋亡蛋白、Myc及Bcl2表达的变化。构建Myc及Bcl2质粒并转染SUDHL-6细胞,通过RT-PCR及流式检测观察过表达相关基因后益气除痰方的作用是否受到影响,并以此证明调控相关基因在抑制“双表达”淋巴瘤的过程中的重要作用。结果:益气除痰方对“双表达”淋巴瘤具有生长抑制作用,且随着时间的增长和浓度的升高,其抑制作用也会随之增强。流式结果显示在加入益气除痰方后线粒体膜电位出现了下降,发生了线粒体凋亡。此外,在转染后的细胞中,Myc及Bcl2的低表达同样会导致线粒体膜电位的下降,诱导线粒体的凋亡。WB结果显示在益气除痰方的作用下Myc及Bcl2蛋白表达下调,相关凋亡蛋白的表达如Caspase 7出现了高表达。RT-PCR实验中,通过细胞转染过表达Myc及Bcl2,发现益气除痰方对“双表达”淋巴瘤细胞的抑制作用出现了下降。结论:益气除痰方可以抑制“双表达”淋巴瘤细胞的生长,其作用机制与诱导线粒体凋亡相关。益气除痰方可能通过作用于Myc及Bcl2两个靶点,来发挥诱导线粒体凋亡从而导致细胞凋亡以及抑制“双表达”淋巴瘤细胞增殖的作用。
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