黄精中三萜皂苷和活性多糖的分离与鉴定

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黄精(Polygonatum sibiricum Red.)在我国分布广泛,资源丰富,是一种具有很大开发潜力的食疗中药。本文以黄精为研究对象,探索其皂苷和多糖的组成及其所具有的生物活性,为进一步开发利用奠定基础。称取25kg黄精,粉碎后用70%乙醇,料液比1:7,回流提取2h,滤出液体,重复3次,滤液合并浓缩得乙醇提取物。将乙醇提取物依次使用石油醚和正丁醇进行萃取,所得正丁醇提取物通过AB-8大孔吸附树脂柱,依次用水、20%~95%乙醇进行梯度洗脱,流出液采用薄层层析法检测后分为九个部分。选取C、D、E部分反复使用ODS柱和MCI柱层析法,乙醇梯度洗脱,薄层层析法检测,从中分离得到两种化合物。通过核磁共振法鉴定出这两个化合物的结构分别为2β,3β(OH)2-(28→1)葡萄糖-(6→1)葡萄糖-(4→1)鼠李糖-乌苏酸(积雪草苷)和2β,3β,6β(OH)3-(28→1)葡萄糖-(6→1)葡萄糖-(4→1)鼠李糖-乌苏酸(羟基积雪草苷)。这两种化合物在黄精中均未见报道。滤渣加6倍量水微沸提取两次,每次3小时,过滤,合并浓缩滤液,用95%乙醇沉淀,重复3次,收集沉淀,用无水乙醇反复洗涤,得黄精多糖粗品。对黄精多糖进行了降血糖活性的研究,结果表明黄精多糖对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠有明显的降血糖作用。黄精多糖通过AB-8大孔吸附树脂柱,依次用水和75%乙醇洗脱,流出液采用薄层层析法检测后分为A、B和C三个部分。选取A部分继续采用DEAE-纤维素柱分离,并依次用水和0.1mol·L-1NaCl溶液洗脱,薄层层析法检测分为三个部分。其中后两个部分分别用Sephadex G-100柱和HW-40柱层析法分离,并用水洗脱,薄层层析法检测,得到一种较纯的多糖。结合气相色谱法对其单糖组成进行分析,并运用核磁共振法对其结构进一步分析,可推测该化合物的结构为以β-1,2相连的酮糖构成主链,且有葡萄糖以α构型连在酮糖上。
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