脑外伤后低氧与继发性脑损伤的实验研究

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目的:继发性脑损伤在重型颅脑外伤病人伤后病程中的作用已日益受到重视,特别是继发脑缺血缺氧是影响预后的一个非常关键的因素。外伤后继发的脑缺血缺氧将加重脑损伤,并可以导致神经元以及胶质细胞坏死和凋亡,而且病理变化过程比脑血管梗塞后的缺血缺氧更复杂。近年来对颅脑外伤后继发缺血缺氧的判断和监测以及对症处理是神经外科的一个研究方向。本实验通过观察特异性的低氧探针( HypoxyprobeTM-1, pimonidazole hydrochloride)的免疫组化染色强度和分布来分析脑挫伤灶周围组织细胞低氧的范围和程度,同时通过RT-PCR和免疫组化分析脑挫伤灶周围组织转化生长因子-β1(TGF-β1)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)二个因子相应时间段的变化,探讨它们与低氧可能存在的相互关系,为临床预防及监测颅脑外伤后继发缺血缺氧提供思路。方法:40只2月龄SD雄性大鼠随机分为对照组、外伤组,每组的20只大鼠随机分为外伤后12小时、1天、3天、5天、7天五个时间段,各组4只。用自由落体致伤的方法制作大鼠重型颅脑外伤模型,应用免疫组化观察大鼠实验性外伤后的脑挫伤灶周围皮层的低氧探针的表达,通过RT-PCR监测TGF-β1和HIF-1α二个因子各个时间段的基因表达,免疫组化分析TGF-β1和HIF-1α二个因子各个时间段的蛋白表达。结果:1.脑组织低氧探针免疫组化显示,外伤组挫伤灶周围皮层可见缺氧表达。伤后12小时组表达最明显。2.各个时间段TGF-β1的基因表达在外伤后5天组明显高于对照组,HIF-1α的基因表达在外伤后3天组明显高于对照组(P<0.01)。3.免疫组化显示外伤组各个时间段TGF-β1、HIF-1α存在相应的蛋白表达。结论:脑外伤后存在的低氧是继发性脑损伤的主要机制之一,在低氧条件下可见TGF-β1、HIF-1α的基因和蛋白表达,并且随时间的变化而变化,TGF-β1、HIF-1α在低氧情况下的表达可能存在相互的影响。
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