试验通过乳腺基部注射金黄色葡萄球菌悬液感染小鼠乳腺诱发乳腺炎，并用金银花和/或连翘三种清热解毒药对金黄色葡萄球菌诱发的小鼠乳腺炎进行预防和治疗，同时分别用EGFP标记E.coli BL21菌株和奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌标准菌株黏附奶牛乳腺上皮细胞制作细菌黏附细胞模型，共同探讨金黄色葡萄球菌感染乳腺的致病机理，以及金银花、连翘防治乳腺炎的作用机理、清热解毒药抗金黄色葡萄球菌黏附乳腺上皮细胞作用机理。采用组织块接种法结合胰酶消化体外分离培养荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞，当细胞长满培养孔底80%左右时，用胰酶经过2-3次差时消化培养的原代细胞即得到纯化的乳腺上皮细胞，对细胞角蛋白18的表达进行检测，鉴定结果显示阳性，即所培养的细胞为上皮型。且奶牛乳腺上皮细胞在波长为514nm光激发下，细胞发出红色荧光。证明乳腺上皮细胞具有自发荧光的特性。利用奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌和EGFP标记E.coli BL21感染乳腺上皮细胞，制作细菌菌黏附乳腺细胞的模型，革兰氏染色法、E.coli BL21经IPTG诱导发荧光后，利用普通光学显微镜、激光共聚焦显微镜和电子扫描显微镜观察：奶牛乳腺上皮细胞胞质被染成浅粉红色，胞核被染成紫红色；粉红色E.coli BL21细菌紧密聚集在奶牛乳腺上皮细胞胞质周围，被染成紫红色的金黄色葡萄球菌，大量成簇聚集在奶牛乳腺上皮细胞胞质周围，靠近胞核；EGFP标记E.coli BL21细菌在488nm绿光激发显示绿色荧光，奶牛乳腺上皮于514nm红光激发下，细胞发出红色荧光，因此可清楚观察到荧光细菌黏附乳腺上皮细胞的部位；金黄色葡萄球菌呈典型的葡萄串状聚集成团黏附乳腺上皮细胞表面。三种方法均证明金黄色葡萄球菌和EGFP标记E.coli BL21成功黏附到乳腺上皮细胞。通过不同浓度104CFU·L-1、105CFU· L-1、106CFU·L-1金黄色葡萄球菌悬液采用基部注入感染小鼠乳腺，诱发小鼠乳腺炎病理模型，H.E.染色观察病理变化。试验结果表明，随着接菌浓度的增加，小鼠乳腺病理变化加剧：由低浓度104CFU·L-1接菌组出现毛细血管有轻度充血、少量腺上皮细胞脱落；至高浓度106CFU·L-1接菌组乳腺腺小叶坏死，间质炎性水肿，腺泡结构崩解，大量腺上皮细胞坏死、脱落；105CFU·L-1组乳腺小叶间质轻微水肿、噬中性粒细胞浸润，腺泡局部崩溃、少量噬中性粒细胞浸润，腺泡腔内少量腺上皮细胞坏死、脱落，毛细血管少量出血。最终本试验选用105CFU·L-1金黄色葡萄球菌悬液作为小鼠乳腺炎诱导剂量。利用清热解毒药金银花和/或连翘水煎液防治乳腺炎小鼠，通过细菌计数检测乳腺感染细菌量、H.E.染色观察病变程度、甲苯胺蓝染色观察肥大细胞数变化、ELISA检测血清中TNF-α含量变化，探讨金银花、连翘防治小鼠乳腺炎的作用效果。试验结果表明，金银花、连翘治疗和预防均可抑制乳腺细菌感染、抑菌效果方面预防比治疗时显著，且三种药中金银花效果优于合药连翘次之。中药预防和治疗均可使乳腺病变减轻，使乳腺功能恢复正常。治疗组中药各组血清中TNF-α的水平趋于正常，预防组中药各组血清中TNF-α的水平低于正常组，其中金银花效果优于合药连翘次之。由肥大细胞显示机体免疫及抗感染情况，治疗组中药各组肥大细胞数均趋于正常，表明机体炎症减轻、细菌感染情况减弱；预防组各种药组肥大细胞数虽减少但未达到正常水平，表明机体仍处于抗感染或炎症期。综上所述，中药金银花、连翘对金黄色葡萄球菌诱发的乳腺炎小鼠防治时，治疗效果好于预防效果，而金银花、连翘和合药之间的效果差异不显著。