大花益母草的化学成分研究

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大花益母草为唇形科益母草属植物大花益母草Leonurus Maxim的地上部分,主要分布于辽宁、吉林及河北北部,具有活血调经、利尿等作用,在民间常作为益母草的替代品,治疗痛经、闭经等妇科疾病。前期研究发现,大花益母草丙酮提取物的二氯甲烷萃取部位能够明显抑制脂多糖(LPS)诱导BV-2小胶质细胞释放一氧化氮(NO),LCMS-IT-TOF分析发现其中富含半日花烷型二萜类成分。本论文对大花益母草二氯甲烷活性部位的化学成分进行了系统分离,并采用LPS诱导小胶质细胞BV-2释放NO模型对单体化合物进行活性筛选。取得了以下主要研究结果:一、对益母草属植物化学成分及药理活性的国内外研究文献进行了系统查阅和综述。文献研究表明,益母草属植物主要含有生物碱、二萜、黄酮、苯乙醇苷、环烯醚萜苷、三萜、环肽和倍半萜等类型化合物;药理活性主要包括心血管保护、神经保护、抗炎镇痛、抗氧化、抗血小板聚集、抗菌、抗肿瘤和细胞毒等。二、对大花益母草的二氯甲烷活性部位进行了系统的化学成分研究,采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20柱色谱和制备HPLC技术,从二氯甲烷萃取部位中分离鉴定了51个化合物,包括二萜类化合物24个:大花益母草素A(1)、6-O-去乙酰大花益母草素A(2)、3-O-乙酰大花益母草素A(3)、15-O-去乙酰大花益母草素A(4)、异大花益母草素A(5)、6-O-去乙酰异大花益母草素A(6)、19-O-去乙酰异大花益母草素A(7)、大花益母草素B(8)、大花益母草素C(9)、异大花益母草素C(10)、6-O-去乙酰异大花益母草素C(11)、大花益母草素D(12)、15-O-去乙酰大花益母草素D(13)、大花益母素E(14)、大花益母草素F(15)、3-O-乙酰大花益母草素F(16)、异大花益母草素F(17)、6-O-乙酰大花益母草素F(18)、6,15-O-二乙酰大花益母草素F(19)、3,6-O-二乙酰大花益母草素F(20)、3,6,15-O-三乙酰大花益母草素F(21)、大花益母草素G(22)、大花益母草素H(23)、大花益母草素Ⅰ(24);降倍半萜类化合物8 个:(7E,6R,9S)-9-hydroxy-4,7-megastigmadien-3-one(25)、(6S,7E)-6-hydroxy-4,7-megastig madien-3,9-dione(26)、vomifoliol(27)、(3S,5R,6S,7E)-3,5,6-trihydroxy-7-megastigmen-9-one(28)、(3S,5R,6S,7E,9R)-5,6-epoxy-3,9-dihydroxy-7-megastigmene(29)、3,4-dihydroxy-7,8-dihydro-β-ionone(30)、黑麦草内酯(31)、(-)-loliolide(32);木脂素类化合物 6 个:(+)-丁香脂素(33)、(+)-1-羟基丁香脂素(34)、rayalinol(35)、erythro-guaiacylglycerol-β-O-4’-coniferyl ether(36)、(7R,7’R,7"S,8S,8’S,8’’S)-3’,4"-dihydroxy-3,5,4’,5"-tetramethoxy-7,9’:7’,9-diepoxy-4,8"-oxy-8,8’-sesquineo-lignan-7",9"-diol(37)、(7R,7’R,7"S,8S,8’S,8"S)-4’,5"-dihydroxy-3,5,3’,4"-tetramethoxy-7,9’:7’,9-diepoxy-4,8"-oxy-8,8’-sesquineo-lignan-7",9"-diol(38);黄酮类化合物3个:4’,5-二羟基-7-甲氧基黄酮(39)、圣草酚(40)、3-羟基芫花素(41);其他类型10个:异莨菪亭(42)、对香豆酸(43)、咖啡酸甲酯(44)、阿魏酸(45)、丁香醛(46)、3-羟基-4-甲氧基苯甲酸(47)、oct-1-en-3-yl β-glucopyranoside(48)、5-羟基-2-吡咯烷酮(49)、5-甲氧基-2-吡咯烷酮(50)、烟酰胺(51)。其中新化合物24个(包括23个半日花烷型二萜和1个克罗烷型二萜),24个属首分。三、采用脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞(BV-2)释放一氧化氮(NO)模型对单体化合物进行了活性筛选。结果表明,化合物1-3,5-10,13,15,21,40和41能不同程度抑制脂多糖诱导的BV-2细胞释放一氧化氮(NO),具有一定的抗炎活性。
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