红豆杉(Taxus)是世界公认濒临灭绝的天然珍稀植物。从红豆杉的根、皮、茎、叶中提取的紫杉醇(paclitaxel)是一种广谱性强、活性高、具有独特抗癌机理的新型抗肿瘤药物。 南方红豆杉(Taxus Mairei)是红豆杉属,为我国特有的红豆杉变种。研究发现,其中除含有紫杉醇外,还有一些本身无活性但含量较高的紫杉烷二萜(taxane ring diterpenoid)成分,可用作合成紫杉醇的原料,其中以浆果赤霉素Ⅲ(BaccatinⅢ)和10-脱乙酰浆果赤霉素Ⅲ(10-deacetyIBaccatinⅢ,10-DABⅢ)最为重要。 10-DABⅢ为有肿瘤抑制作用的紫杉烷二萜类化合物,可利用它合成更高抗癌活性的多烯紫杉醇(taxotere)。紫杉醇主要存在于树杆和树皮中,10-DABⅢ主要存在于树叶中,而叶中10-DABⅢ的含量一般大大高于紫杉醇的含量。红豆杉是国家珍稀保护植物,而且生长缓慢,如果直接从红豆杉树皮中提取紫杉醇,不仅资源有限,而且不利于红豆杉资源的保护。 本文综合调研了自19世纪60年代以来一直倍受关注的各种红豆杉属植物中紫杉醇和其他生物活性成分的开发及研究情况,并以南方红豆杉的枝叶为原料,对其中的活性成分10-DABⅢ的分离和纯化条件进行了深入细致的研究,包括红豆杉树叶的预处理条件的研究,对红豆杉树叶粗提及初级萃取条件的研究,对其粗提液的次级萃取及色谱条件的研究,以及10-DABⅢ粗产品重结晶条件的研究,并对各个环节中的分离与纯化条件进行了优化筛选,确定了最佳的工艺路线。 本研究综合运用浸提、萃取(包括液液萃取和反萃取)、色谱分离和重结晶技术,得到了用以合成高效抗癌药紫杉醇的前体——10-DABⅢ晶体,并采用UV、HPLC法进行分析鉴定,晶体纯度可达91%,整个工艺收率达到7.9%。 本研究所提供的方法及工艺路线不仅可以获得成本合理、效果明显的天然抗肿瘤新药,而且对红豆杉珍稀树种的保护及红豆杉资源的可持续利用都具有十分深远的意义。