TGF-β1和TSA对胰腺癌细胞EMT相关调节作用的研究

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背景:在胰腺癌中,上皮向间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)在肿瘤进展、转移、放化疗耐受等方面占据重要地位,但EMT调控机制尚不明了。转录生长因子β1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)和曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对肿瘤EMT过程具有调节作用。本研究旨在探讨在不同分化程度的胰腺癌细胞中,TGF-β1和TSA对EMT及肿瘤转移的具体调控作用。方法:以三种胰腺癌细胞株PANC-1(低分化)、Patu8988(中分化)、SW1990(高分化)为研究对象。实时PCR和western blot检测EMT相关指标的表达;流式细胞术检测PANC-1细胞中胰腺癌干细胞CD24+CD44+ESA+细胞的数量比例变化;Transwell迁移和侵袭试验分别检测PANC-1细胞的迁移、侵袭能力。结果:1.未干预情况下,EMT相关的上皮和间质指标在三种胰腺癌细胞PANC-1、Patu8988和SW1990中的表达各不相同;相比Patu8988和SW1990细胞,PANC-1细胞中上皮指标表达较低,间质指标表达较高。2.TGF-β1可诱导胰腺癌PANC-1细胞发生EMT,表现为上皮指标E-cadherin表达降低,间质指标N-cadherin、fibronectin和Vimentin表达升高。而且,发现5ng/ml的TGF-β1诱导PANC-1细胞发生EMT效果最佳。但是,TGF-β1不能诱导Patu8988、SW1990细胞发生EMT过程。3.在PANC-1细胞中,TSA抑制了TGF-β1诱导的EMT,表现为E-cadherin表达增加,Vimentin表达减少;但TSA不能刺激Patu8988、SW1990细胞发生改变。4.TGF-β1可降低CD24+CD44+ESA+的PANC-1细胞比例,而TSA逆转了这种下降趋势。5.TGF-β1增强了PANC-1细胞迁徙和侵袭能力,而TSA抑制了TGF-β1诱导增加的迁移侵袭能力。结论:在三种不同分化程度的胰腺癌细胞中,TGF-β1可刺激PANC-1细胞发生EMT,而不能诱导Patu8988和SW1990细胞发生EMT。在PANC-1细胞,TSA能逆转TGF-β1诱导的EMT过程。TGF-β1和TSA在PANC-1胰腺癌细胞干细胞特性、迁移和侵袭方面发挥相反的作用。
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