年龄对侧柏茎段培养快速繁殖的影响与黄帝手植柏克隆

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chengyihan
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侧柏是我国最常用的荒山造林树种之一,具有较大的生态价值和药用价值。目前,侧柏多使用实生苗、扦插等传统繁殖方式,难以满足市场需求,通过植物组织培养技术可以进行工厂化生产,在短期内获得大量具有优良性状的侧柏苗。黄帝手植柏是我国特级古树名木,具有特殊的历史文化价值。近年来,黄帝手植柏由于年龄巨大,长势逐渐衰弱,急需进行保护保存工作,植物组织培养技术是植物克隆和种质资源保存的重要方法。本研究先以年龄约为50、800、3000年的侧柏一年生茎段为外植体,通过腋芽增殖途径进行侧柏茎段培养快速繁殖技术研究,主要探讨了基本培养基、激素(植物生长调节剂)种类和浓度、大量元素浓度对侧柏茎段培养的影响。在此基础上,分析了年龄对侧柏茎段培养的影响,初步筛选了可能适宜于黄帝手植柏茎段培养各阶段的培养基,再以黄帝手植柏一年生茎段为外植体,进一步试验筛选出各阶段最适培养基。主要研究结果如下:(1)各个年龄段侧柏的茎段污染率均随升汞消毒时间的延长而降低,但各个处理间结果差异不显著。50年侧柏几乎不会受升汞影响而死亡,侧柏古树则会随着升汞消毒时间延长出现死亡现象。随着侧柏年龄增大,最佳升汞消毒时间逐渐缩短。50、800、3000年侧柏和黄帝手植柏最佳升汞消毒时间分别为14min、14min、10min、8min,存活率分别为77.50%、70.97%、73.53%、72.97%。(2)各个年龄段的侧柏茎段在不同培养基上都能恢复生长,且启动率均在90%以上,同时适量的激素可以促进茎段生长。选择MS+0.1 mg·L-1NAA+0.1 mg·L-16-BA作为50、800、3000年侧柏和黄帝手植柏的最佳启动培养基。(3)MS基本培养基在不同年龄段的侧柏茎段增殖培养中均有较好效果;并且不同年龄段的侧柏茎段增殖培养需要的激素水平不同,50年侧柏适宜较高的NAA和6-BA浓度,侧柏古树需要中等水平的NAA和6-BA浓度;降低MS培养基中大量元素的浓度,不同年龄段侧柏的增殖系数普遍呈下降趋势。50年侧柏最佳增殖培养基为MS+0.2 mg·L-1NAA+0.3 mg·L-16-BA,增殖系数为2.40;800年侧柏最佳增殖培养基为MS+0.1 mg·L-1NAA+0.3 mg·L-16-BA,增殖系数为2.57;3000年侧柏最佳增殖培养基为3/4MS+0.1 mg·L-1NAA+0.3 mg·L-16-BA,增殖系数为2.33;黄帝手植柏最佳增殖培养基为MS+0.1 mg·L-1NAA+0.2 mg·L-16-BA,增殖系数为2.52。(4)随着侧柏年龄的增大,侧柏生根更加困难,并且低年龄的侧柏和侧柏古树对培养基和植物生长调节剂的要求也有所不同。50年侧柏生根培养的最佳基本培养基为White培养基,最佳激素配比为0.2 mg·L-1IBA+0.1 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1NAA;800、3000年和黄帝手植柏的最佳生根培养基均为MS+0.1 mg·L-1IBA+0.1 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1NAA,60d生根率分别为23.08%、11.53%、10.00%。
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