【摘 要】
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第一部分不同方式诱导白色脂肪组织棕色化过程中差异表达miRNA及其潜在调控机制分析目的探究不同刺激条件下,小鼠白色脂肪组织棕色化过程中差异表达的miRNAs,并分析其在棕色化过程中潜在的分子调控机制。材料与方法构建小鼠腹股沟皮下白色脂肪组织棕色化模型,一组低温刺激,另一组为腹腔注射CL316,243。通过HE染色和产热相关基因表达分析等,确定皮下白色脂肪组织棕色化模型的建立。通过RNA测序得到不同
【基金项目】
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国家自然科学基金（编号81970739,81471071,81270948）； 留学回国人员科研启动基金资助项目（第46批,教外司[2013]693号）；
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第一部分不同方式诱导白色脂肪组织棕色化过程中差异表达miRNA及其潜在调控机制分析目的探究不同刺激条件下,小鼠白色脂肪组织棕色化过程中差异表达的miRNAs,并分析其在棕色化过程中潜在的分子调控机制。材料与方法构建小鼠腹股沟皮下白色脂肪组织棕色化模型,一组低温刺激,另一组为腹腔注射CL316,243。通过HE染色和产热相关基因表达分析等,确定皮下白色脂肪组织棕色化模型的建立。通过RNA测序得到不同条件下皮下白色脂肪组织的miRNAs表达谱并筛选出两组内差异表达趋势相同的miRNAs,并通过实时荧光定量PCR验证;通过生物信息学预测miRNAs靶基因,并通过实时荧光定量PCR进一步验证其表达水平。结果冷刺激和CL316,243均能诱导皮下白色脂肪组织棕色化,同时皮下白色脂肪组织的miRNAs表达谱在诱导前后存在明显差异。经差异表达miRNA筛选后,检测不同白色脂肪组织棕色化诱导条件下,miR-30e-3p表达均升高,miR-181a-5p表达都为下降。经靶基因预测及验证,Cdk6和Sirt1分别是miR-30e-3p和miR-181a-5p参与调控皮下白色脂肪组织棕色化的潜在靶点。结论冷刺激及CL316,243处理小鼠皮下白色脂肪组织棕色化后miRNA表达差异明显,其中miR-30e-3p和miR-181a-5p分别可能通过靶基因Cdk6和Sirt1参与调控皮下白色脂肪组织棕色化过程。第二部分tsRNA在白色脂肪组织棕色化过程中表达变化分析目的探究不同刺激条件下,小鼠白色脂肪组织棕色化过程中差异表达的tsRNAs,并分析其在棕色化过程中潜在的分子调控机制。材料与方法构建小鼠腹股沟皮下白色脂肪组织棕色化模型,一组低温刺激,另一组为腹腔注射CL316,243。通过HE染色和产热相关基因表达分析等,确定皮下白色脂肪组织棕色化模型的建立。通过RNA测序得到不同条件下皮下白色脂肪组织的tsRNAs表达谱并筛选出两组内差异表达趋势相同的tsRNAs,并通过实时荧光定量PCR验证;通过生物信息学预测tsRNAs靶基因,并通过实时荧光定量PCR进一步验证其表达水平。结果冷刺激和CL316,243均能诱导皮下白色脂肪组织棕色化,同时皮下白色脂肪组织的tsRNAs表达谱在诱导前后存在明显差异,其tsRNAs长度分布及前体来源tRNA种类均与WAT棕色化密切相关。对tsRNAs靶基因的富集分析结果显示,tsRNA可能通过PI3K-Akt等通路对WAT棕色化进行调控。结论皮下白色脂肪组织的tsRNAs表达谱在诱导前后存在明显差异,其靶基因富集分析结果显示tsRNA可能通过PI3K-Akt等通路对WAT棕色化进行调控。
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