Tfh细胞辅助的体液免疫应答在CHB患者获得HBeAg血清转换中的作用研究

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目的:通过检测并观察外周血中的滤泡辅助性T细胞(T follicular helper cells,Tfh细胞)及CD19+B细胞的频数及其表型变化,探讨Tfh细胞辅助的体液免疫应答在聚乙二醇干扰素-α(Pegylated interferon alpha,PEG-IFN-α)治疗的HBeAg阳性慢性乙型病毒性肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者获得HBeAg血清转换过程中的作用,并探索一个能够反映病毒因素和宿主免疫状态的指标来早期预测经PEG-IFN-α治疗的HBeAg阳性CHB患者的HBeAg血清转换。方法:26例接受了48周的PEG-IFN-α治疗的HBeAg阳性CHB患者,采集患者基线、治疗后第12周、24周、36周、48周以及停药后第12周、24周的外周血,用流式细胞技术检测各时间点患者外周血中Tfh细胞和CD19+B细胞的表达频数,并检测其表达的表面分子(ICOS、PD-1、CD40L、IL-21R、ICOSL、PD-L1、CD40)的水平。此外,检测患者血清中HBV DNA定量、HBs Ag、抗HBs、HBeAg、抗HBe、ALT和AST等临床指标,用逻辑回归方法分析影响HBeAg血清转换的因素。结果:(1)经peg-ifn-α治疗后所有患者的tfh细胞和cd19+cd38+b细胞频数均增加,但发生hbeag血清转换的患者tfh细胞和cd19+cd38+b细胞频数增加更为明显,且在治疗第24周达到最大值。(2)在治疗第24周,患者hbeag水平与tfh细胞频数呈负相关,而tfh细胞频数与cd19+cd38+b细胞频数呈正相关。(3)在治疗第24周时,发生hbeag血清转换的患者icos、cd40l、il-21r、icosl、cd40的表达均要高于未发生hbeag血清转换的患者,而pd-1和pd-l1的表达水平均明显低于未发生hbeag血清转换的患者。(4)从基线水平至治疗第24周,tfh细胞表面表达的pd-1在发生hbeag血清转换的患者呈下降趋势,而在未发生hbeag血清转换的患者呈上升趋势;治疗过程中,cd19+cd38+b细胞表面表达的pd-l1在两组患者中均有下降,但在发生hbeag血清转换的患者中pd-l1的下降趋势更为明显;但两组细胞的变化趋势比较,差异均无统计学意义。(5)治疗第24周的tfh细胞频数与第12周的hbsag水平分别与hbeag血清转换有关,经roc曲线及逻辑回归分析表明,治疗第24周的tfh细胞频数与第12周的hbsag水平的比值——一个结合了病毒因素与宿主免疫状态的指标,能够更有效的预测经peg-ifn-α治疗的hbeag阳性chb患者的hbeag血清转换。结论:tfh细胞辅助的体液免疫应答的功能失调与经peg-ifn-α治疗的hbeag阳性chb患者获得hbeag血清转换失败有关,并且治疗第24周的tfh细胞频数与第12周的hbsag水平的比值能够作为一个早期预测患者hbeag血清转换的有效指标。
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