目的：热毒清颗粒作为医院制剂已在临床使用多年,主治风热感冒,疗效确切。在尊重临床使用经验(水提取工艺路线及每日服用生药量)的基础上,按照中药新药药学研究的相关指导原则,对热毒清颗粒制备工艺进行研究。方法及结果：本方医疗机构制剂项下每日服用生药量45g,采用水提收油工艺路线,得膏率约20%,每日服用三次,折算每次服用浸膏粉约为3g,若制备片剂、胶囊等剂型则服用剂量偏大,因此确定剂型为日服用生药量较大、稳定性好的颗粒剂。根据预实验结果,热毒清处方循常规采用合煎收油工艺(12、8、8倍水煎煮三次,时间分别为1.5、1、1小时),君药中绿原酸、连翘酯苷A的保留率分别仅为36.1%、36.9%,提示常规复方合煎工艺并下君药中绿原酸及连翘酯苷A保留率偏低。通过实验发现,钩藤与金银花合并煎煮,导致绿原酸保留率显著下降；连翘酯苷A在100℃C下长时间受热亦降解达50%。由上述实验可知,金银花不宜与钩藤合煎,连翘不宜长时间高温煎煮,拟将方中金银花、连翘(粉碎过20目筛)浸提(80℃浸泡1小时,药渣加水煎煮20分钟)后,药渣再与复方余药合并煎煮。该工艺路线在中试规模的尝试表明,绿原酸、连翘酯苷A保留率均超过70%。在确定以上工艺路线基础上,以绿原酸、连翘酯苷A、连翘苷、哈巴俄苷综合保留率为指标,通过单因素实验结合正交实验,考察浸泡次数(单因素实验)、浸泡时间、浸泡加水量、煎煮时间、煎煮加水量(正交试验)对浸提组的影响,考察君药浸泡后煎煮次数、药渣与余药合煎加水量、煎煮次数、煎煮时间对复方组的影响,热毒清颗粒提取工艺条件确定为：金银花、连翘(粉碎过20目筛)加10倍量水80℃浸泡1小时,滤过,药渣加10倍量水煎煮1次,煎煮时间为20分钟,滤过,合并滤液,金银花、连翘药渣与复方余药合并加10倍量水煎煮两次,煎煮时间为1.5、1小时,同时收集挥发油。实验观察复方挥发油出油开始期为15min,出油高峰期为35min,出油结束期为70min,故拟定提取工艺亦满足挥发油提取要求。验证实验表明,该工艺条件下绿原酸保留率75.11±5.11%；连翘酯苷A平保留率为74.97%±4.29%；哈巴俄苷保留率为73.10±9.78%；连翘苷保留率为90.63±2.13%；胡薄荷酮平均保留率为72.22±9.07%；综合保留率为77.19%。采用L9(34)正交试验,以复方挥发油中胡薄荷酮包合率及保留率为指标,优化热毒清颗粒挥发油包合工艺,确定用挥发油6倍量的β-CD,加β-CD2倍量的水包合15min。验证实验表明在该工艺下复方挥发油包合率为97.98±3.00%,重复性良好。挥发油包合液经喷雾干燥后,胡薄荷酮保留率仍超过90%,提示挥发油β-CD包合液可与复方水提浓缩液合并进行喷雾干燥。金银花连翘浸提液、金银花连翘药渣与方中余药合提液的分组浓缩工艺研究确定：金银花、连翘浸提液65℃减压浓缩至相对密度约1.05(50℃)；金银花连翘药渣与余药合提液75℃减压浓缩至相对密度约1.10(50℃),混合。该条件有利于药液中热不稳定性成分绿原酸、连翘酯苷A的保留。不同干燥工艺路线(常压干燥、减压干燥、喷雾干燥)对复方浓缩液指标成分的影响实验显示：常压干燥后绿原酸、连翘酯苷A、哈巴俄苷、连翘苷保留率分别为：88.70%、93.59%、79.48%、98.84%；减压干燥后绿原酸、连翘酯苷A、哈巴俄苷、连翘苷保留率分别为：89.34%、99.70%、85.66%、96.18%,喷雾干燥后绿原酸、连翘酯苷A、哈巴俄苷、连翘苷保留率分别为：89.62%、100.21%、85.99%,94.39%。在实验条件下,常压干燥工艺哈巴俄苷损失较多；喷雾干燥、减压干燥条件下各指标成分基本保留。表明喷雾干燥、减压干燥均适用于热毒清浓缩液的干燥。开展辅料筛选与矫味实验,颗粒较佳的口感,有利于改善患者的顺应性。热毒清颗粒辅料确定为：加入浸膏粉质量0.5倍量的倍他环糊精与浸膏粉质量约3倍量蔗糖。按确定的辅料种类及用量,喷雾干燥粉与辅料细粉混合均匀后进行干法制粒,确定制粒工艺参数为：进料速度为18rpm,压辊转速为10rpm,主压力为4.5Mpa。所得颗粒的临界相对湿度为68.43%。基于实验室小试工艺研究基础,开展热毒清颗粒中试工艺研究,以绿原酸、连翘酯苷A、哈巴俄苷、连翘苷及胡薄荷酮保留率为工艺跟踪指标,考察实验室小试条件下所得分组提取工艺、分组浓缩工艺、挥发油包合工艺、干燥工艺、制粒工艺参数可否适用于生产规模。结果表明中试工艺制得的热毒清颗粒绿原酸、连翘酯苷A、哈巴俄苷、连翘苷、胡薄荷酮保留率分别为：78.46%、68.88%、52.39%、82.60%、58.06%。中试产品经检验合格。提示本课题所优选的复方制备工艺合理可行,适于生产。其中绿原酸、连翘酯苷A保留率明显高于常规工艺保留率。结论：热毒清颗粒的制备工艺能显著提高有效成分绿原酸及连翘酯苷A的保留,其阶段分组处理的方法具有简便、可行的特点,本研究为同类银翘制剂的生产提供了借鉴。